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看完這些你就知道激光共聚焦顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)了

閱讀:1783發(fā)布時(shí)間:2021-3-11

  傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場(chǎng)光源,標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射或散射光的干擾;
 
  激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點(diǎn)掃描,標(biāo)本上的被照射點(diǎn),在探測(cè)針孔處成像,由探測(cè)針孔后的光點(diǎn)倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點(diǎn)或逐線接收,迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。
 
  照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像,這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點(diǎn)。
 
  激光共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。
 
  把光學(xué)成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像,在亞細(xì)胞水平上觀察生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化,成為形態(tài)學(xué),分子生物學(xué),神經(jīng)科學(xué),藥理學(xué),遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代的研究工具。
 
  下面讓我們一起來了解一下激光共聚焦顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)吧
 
  1、以激光為光源,在相應(yīng)的熒光探針標(biāo)記后,對(duì)樣本進(jìn)行逐點(diǎn)掃描,逐層獲得二維光學(xué)橫斷面圖像,具有“細(xì)胞CT”的功能,并可通過計(jì)算機(jī)三維重建軟件支持,獲得三維圖像,并可以任意角度旋轉(zhuǎn),觀察細(xì)胞,組織立體形態(tài)和空間關(guān)系;
 
  2、可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行無損傷的觀察,動(dòng)態(tài)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)的Ca離子濃度和pH值等活細(xì)胞生理信息;
 
  3、可對(duì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞間通訊,細(xì)胞融合,細(xì)胞骨架彈性測(cè)量等,可用作“光刀子”完成細(xì)胞內(nèi)“外科手術(shù)”。這一技術(shù)可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行原位動(dòng)態(tài)定量的觀察和測(cè)量。
 
  與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比,激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率,實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r(shí)可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點(diǎn)

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