豬口蹄抗原(區分野毒與疫苗毒)ELISA試劑盒

1. 血清標本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本，全血標本室溫放置1－2 h或4℃隔夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

2. 血漿標本收集、處理、保存方法：

根據樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

3. 尿液標本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

4. 唾液標本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

5. 細胞標本收集、處理、保存方法:

（1）細胞培養上清

 取細胞培養上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

（2）細胞裂解液

收集細胞培養液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通過反復凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

6. 植物標本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

7. 糞便標本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

8. 組織標本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量小）。將組織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

豬口蹄抗原(區分野毒與疫苗毒)ELISA試劑盒

1．ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

豬口蹄抗原(區分野毒與疫苗毒)ELISA試劑盒

1. 靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。2. 特異性：常用交叉反應率表示。其越高說明特異性越好。 

3. 精密度：ELISA試劑一般指其批內CV，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍

4. 穩定性：試劑在規定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩定一天相當于4-10℃保存一個半月。 

5. 簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。

6. 安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。 

7. 經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。 

試劑評價：需要有的確證方法確證的樣品進行檢測，一般實驗室不易取得此類樣品，每新購進一次試劑評價也很麻煩。可以通過間接的回收實驗對試劑進行選擇