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液相色譜柱的使用

2016-11-24 閱讀(3966)

液相色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。
    液相色譜柱使用一段時間后,常遇到柱子被污染,柱效會有一定程度的下降,采用適當(dāng)?shù)姆椒▽ιV柱進(jìn)行保護(hù),可以延長色譜柱的使用壽命。樣品和流動相的處理:溶解的樣品進(jìn)樣前用濾膜過濾,以除去不溶物。如果必要,需進(jìn)行樣品的預(yù)處理。流動相中如有不純物質(zhì)將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動相使用前用微孔薄膜過濾。在流動相的輸液管前安裝過濾器。過濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵塞嚴(yán)重的過濾器,可在火焰上灼燒后再清洗。保護(hù)柱(預(yù)柱)的使用:對于較昂貴的色譜柱,可以在柱前加一保護(hù)柱,防止樣品中雜質(zhì)污染分析柱,對于制備柱,因其進(jìn)樣量大,使用保護(hù)柱尤為重要。
   
液相色譜柱的使用注意事項(xiàng):
    色譜柱的柱效和保護(hù)柱
    拿到一根新柱時,一定要先看其使說明,然后測柱效,定期檢測柱效, 保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件, 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應(yīng)用于在線監(jiān)測, 應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù), 例如采取安裝在線過濾器, 自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效, 在需要高柱效的時候常用, 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染。 缺點(diǎn)是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效, 特別是在用微柱時,常用的是普通 自裝填料的保護(hù)柱。
    色譜柱的清洗
    對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷 1 0 0 - 2 0 O r aL依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇一lvfang一甲醇一水依次沖洗,每種色譜柱有特定的清洗方法,一定要看其使用說明
    色譜柱的存放
    存放前除去雜質(zhì)和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機(jī)械振動,防止細(xì)菌生長,注意存放的溫度。



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