手性柱+手性分離是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引進手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。
要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。
手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化活動相和溫度以達到*分離效果。
手性柱+手性分離使用注意事項
1)強烈建議使用保護柱；
2)必須使用色譜純試劑配制流動相，使用前需經0.45μm濾膜過濾和超聲脫氣處理；
3)在進樣前需過濾樣品溶液；
4)在使用含酸/堿/鹽的流動相后，應立即使用30%甲醇-水或50%乙腈-水沖洗色譜柱，沖洗體積不少于40 mL，再使用甲醇或乙腈沖洗后保存。若流動相中不含酸、堿或鹽等，直接使用乙腈或甲醇沖洗后保存；
5)若保存色譜柱超過一周，需將柱內溶劑替換為甲醇；
6)當柱壓顯著升高時，使用相當于20倍柱體積的溶劑按30％甲醇-水→甲醇→異丙醇→甲醇次序沖洗色譜柱，可提高性能。
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