氯霉素（chloramphenicol，CAP）是一種廣譜性抗生素，是某些微生物，如（Streptomyces venezuelae）的次生代謝產物，能有效地抗革蘭氏陽性、革蘭氏陰性、里克次氏體、支原體、衣原體等微生物。自1950年以來，氯霉素因方便適用，價格便宜，而作為獸藥被廣泛的使用。氯霉素因被發現對人體骨髓造血機能有抑制作用，可引起人的粒細胞缺乏病，再生障礙性貧血和溶血性貧血，甚至可導致食用者死亡。
目前，檢測氯霉素的方法大致可分為篩選方法和確證方法。
常用的篩選方法有微生物學方法、放射免疫法和酶聯免疫法。微生物法靈敏度低、反應選擇性差；放射免疫法存在同位素半衰期短、放射性污染等不足；酶聯免疫法作為目前檢測氯霉素的主要方法，又有假陽性高、不能確證的缺點。
確證方法中氣質聯用法需要對氯霉素分子中的兩個羥基進行衍生化以提高其揮發性，實驗周期長，步驟繁瑣。LC-MS法具有定性、定量準確，檢測限低，無需衍生化等優點。
參考標準
GB 31658.2-2021 食品安全國家標準 動物性食品中氯霉素殘留量的測定 液相色譜-質譜/質譜法
提取步驟
稱取樣品 5.00g于50mL離心管中，加入4%氯化鈉溶液5mL，乙腈5mL，渦旋2min，8000 r/min，離心5min，取上清液，殘渣重復提取1次，合并上清液。加入正己烷5mL，渦旋振蕩1min，4000r/min，離心5min，棄去上層液，正己烷重復處理1次。加水飽和的乙酸乙酯溶液5mL ，渦旋60s，4000r/min，離心5min，上層液轉移到15mL離心管中，重復提取1次，合并提取液，45℃氮氣吹干，加水-乙腈（95:5）3mL，溶解，備用。
取固相萃取柱Welchrom® C18E 500mg 3mL，依次用甲醇、水各10mL預洗；
取備用液過柱；
加水洗柱2次，每次3mL；
加入4mL甲醇水（50:50）洗脫，過柱流速為1滴/s；
加水飽和乙酸乙酯溶液4mL，渦旋1min，4000r/min，離心5min，取上層液，重復處理1次，合并上層液，氮氣吹干。流動相1mL溶解，混勻，過0.22μm濾膜，上機。
注：由于填料較厚，導致無法自然滴落，需要使用真空泵，保持1滴/s流速。
色譜條件
色譜柱：月旭Boltimate® LP-C18 Core Shell (2.1×150mm，2.7μm)。
流動相：甲醇：水=50：50；
柱溫：30℃；
流速：0.3 mL/min；
進樣量：5μL。
質譜條件
離子源：ESI；
檢測方式：MRM；
干燥氣：氮氣，350℃，流速：1000L/Hr；
碰撞氣：氬氣；
離子噴霧電壓：1.5kV。
譜圖數據
結論
使用Welchrom® C18E 500mg 3mL SPE凈化后，回收率滿足要求。
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