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疏水層析是根據分子表面疏水性不同來分離生物大分子的一種方法，和反相層析分離物質的依據是一致的，都是利用疏水介質的疏水性配基與流動相中的一些疏水分子發生可逆性結合而進行分離。根據蛋白質的疏水性差異，在高鹽溶液中，蛋白質會與疏水配基相結合，而其他的雜蛋白則沒有這種性質，可以將蛋白質初步的分離，用于蛋白質鹽析之后的進一步提純。

1. 采用了鹽的水溶液作為流動相，色譜條件溫和，生物大分子的活性回收率很高。

2. 蛋白質在HIC操作過程中是高鹽上樣，低鹽洗脫（高鹽濃度的樣品不必作處理就可直接上樣）。

3. 在一次色譜中可同時實現出去鹽酸胍、蛋白質復性和分離三個目的。

4. 溫度升高，蛋白質天然折疊伸展，暴露出更多內部疏水集團，使蛋白質的HIC保留發生變化。

5. 色譜填料穩定性好，鹽水體系作流動相無環境污染。

一類鹽（如Na₂SO₄、(NH₄)₂SO₄等）可以使溶液中蛋白質的構象穩定，會促進蛋白質自身間的疏水作用而析出，或者促進蛋白質與配基之間的疏水作用而保留在柱上，這類鹽叫鹽析性鹽。鹽析性鹽的摩爾表面張力增量也大（除了有特異作用的鹽如CaCl₂、MgCl₂外）。

有一些鹽，如硫氰酸鹽、鹽酸胍等，會提高蛋白質的水溶性，同時會使蛋白質變性，這類鹽叫鹽溶性鹽。鹽溶性鹽的摩爾表面張力增量小。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF

疏水層析介質

Phenyl Tanrose 6FF屬于芳香族疏水介質，疏水性*。根據配基取代程度不同分為：高取代（High Sub簡稱HS）和低取代（Low Sub簡稱LS）兩種介質。苯基通過不帶電，化學性質穩定的醚鍵連接到瓊脂糖上。

Butyl Tanrose 4FF和Octyl Tanrose 4FF這兩種介質屬于脂肪族疏水介質，Butyl Tanrose 4FF配基為丁基，Octyl Tanrose 4FF 配基為辛基：這兩種配基通過不帶電且化學穩定性的醚鍵同高度交聯的瓊脂糖偶聯而成。

Butyl-S Tanrose 6FF是疏水性最弱的疏水介質，適合在較低鹽濃度條件下純化強疏水性分子，可去除脂肪類，脂蛋白，色素等，在酵母重組表達乙肝疫苗純化過程中發揮重要作用。