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微生物檢測凍干質控菌種的使用說明!

時間:2019/4/15閱讀:2688
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微生物檢測凍干質控菌種的使用說明!

 

微生物檢測凍干質控菌種白色念珠菌標準菌株使用說明書

  1 復蘇菌種前應準備適于該菌種生長的固體、液體培養基和培養設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。

  2 啟開菌種前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞,加入0.3mL左右的配套液體培養基,用無菌滴管反復吹吸,將凍干菌種溶解成為懸液,然后用無菌滴管或接種環移至斜面、平板或液體培養基,并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養箱中進行培養。(菌種與培養和保存方法對應表見附表1,培養基、培養方法和傳代保存方法見附表2)。

  3 次日觀察菌種的生長情況,如未生長,應繼續培養24h,或吸取培養之后的菌懸液中再次接種培養基,培養24h觀察。

  4 菌株為一次性使用品,開啟之后不能反復使用或保存,暫不開啟的菌種應在4℃保藏。

  5 復蘇后的菌種在傳1-2代后使用,建議菌種使用5代后棄用。

  注):購買后請盡量及時使用凍干菌種,如發現菌種不活或污染等情況,請在購買之日起1個月內與我們。

  凍干菌種白色念珠菌標準菌株復蘇示意圖:

 

培養基、培養條件和保存方法

  方法1:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養基,充分懸浮后取適量的菌懸液于營養瓊脂(022020)斜面上35-37℃劃線培養24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存,每個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

  方法2:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養基,充分懸浮后取適量的菌懸液于營養瓊脂(022020)斜面上劃線35-37℃培養24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存,每個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

  方法3:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養基,充分懸浮后取適量的菌懸液于血平板(024070)后涂布,35-37℃培養24-48h。平板(*代)放于4℃冰箱保存,并用封口膜或其它封條密封平板,每半個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

  方法4:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養基,充分懸浮后取適量的菌懸液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培養24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存,每個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

  方法5:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養基,充分懸浮后取適量的菌懸液于皰肉牛肉粒肉湯(027140)加液體石蠟1cm,35-37℃培養48-72h。肉湯(*代)放于4℃冰箱環境下保存,每半個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

  方法6:

  無菌條件下,用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入堿性蛋白胨水,充分懸浮后取適量的菌懸液于堿性瓊脂(025040)斜面上35-37℃培養24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存,每個月轉接一次,代數以此類推,建議使用菌種代數不超過5代,5代后菌種應銷毀。

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