關于高效液相色譜儀在操作時遇到的技術問題解答
常見問題整理如下
1、高效液相色譜儀是如何實現高效、快速、靈敏這些特點的?
解:氣相色譜理論和技術上的成就為液相色譜的發展創造條件,從它的高效、高速和高靈敏渡得到啟發,采用5一10四微粒出定相以提高柱效,采用高壓泵加快液體流動相的流速;設計高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測器,提高檢測靈敏度,克服經典液相色譜曲缺點,從而達到高效、快速、靈敏。
2、簡述液相色譜中引起色譜峰擴展的主要因素,如何減少諳帶擴張、提高柱效?
解:液相色譜中引起色諾峰擴展的主要因素為渦流擴散、流動相傳質、停留流動相傳質及柱外效應。
在液相色譜中要減小譜帶擴張,提高柱效,要減少續料顆粒直徑,減小境料孔穴深度,提高裝填的均勻性,采用低粘度溶劑作流動相,流速盡可能低,同時要盡可能采用死體積較小的進樣器、檢測器、接頭和傳輸管線等。
3、為什么要提出折合參數?有何特點?
解:我們知道色譜操作條件對板高是有影響的.Giddings發現,固定相相同,填充良好,共是粒度dp不同,因而H-u曲線不同,在液相色譜中,培板高度是粒度的函數,為了比較不向色譜條件下的板**.提出折合參數,包括折合板高、折合流速、折合柱長。其特點是對于不同粒度的填料能得到相同的H—ur 曲線,因此可以在相同的條件下比較不同填料的柱效。
4、高效液相色譜柱有哪幾種類型? 細徑柱有什么優點?
解:高效液相色譜拄大致可分為三種類型:內徑小于2mm的稱為細管徑或微管徑柱;內徑在2~5mm范圍內的是常規高效液相色譜柱;內徑大于5mm的一般稱為半制備柱或制備柱。細管徑柱的主要優點是:(1)分離效能高。(2)流動相*佳流速低,消耗量少。(3)可采用多種檢測器,便于聯用(CLC MS,CLC-FTIR)。(4)采用細而短的毛細管柱可以提高分析速度,實現快速分析。
5、對液相色譜流動相有何要求?
解:用作液相色譜流動相的溶劑,其純度和化學特性必須滿足色譜過程中穩定性和重復性的要求。對樣品要有一定的溶解能力,粘度小,化學穩定性好,避免發生不可逆的化學吸附。溶劑應與檢測器相匹配,不干涉所使用檢測器的工作,制備色譜的溶劑應不干擾對分離各組分的回收。除此以外,選擇的溶劑對所給定的樣品組分具有合適的極性和良好的選擇性。
等等等等