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國產液相色譜操作要求
國產液相色譜應用是用于分離植物色素,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時,玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進行鑒定。色譜法也由此而得名。
現在的色譜法早已不局限于色素的分離,其方法也早已得到了極大的發展,但其分離的原理仍然是一樣的。我們仍然叫它色譜分析。
一、色譜分離基本原理:
由以上方法可知,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相。
國產液相色譜的分離原理就是利用待分離的各種物質在兩相中的分配系數、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,混合物中的各組分與固定相發生相互作用。
由于混合物中各組分在性質和結構上的差異,與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經過反復多次的分配平衡,液相色譜使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當的柱后檢測方法結合,實現混合物中各組分的分離與檢測。
國產液相色譜操作要求:
1、液相開機前先檢查洗針液、柱塞清洗液是否足夠;
2、液相開機后,首先確保柱塞清洗運行,再執行其它操作。
3、開機排氣時,有“purge”閥的儀器應先打開“purge”閥再開泵以5ml/min的流速排氣,關“purge”閥的時候先把流速降到 1ml/min再關,切不可吧順序弄反,否則系統壓力會瞬間變高。
4、使用自動進樣器時,建議啟用“洗針進樣”方式,以降低樣品殘留,對于有些強殘留的物質可以選擇降低濃度或減小進樣量。
5、國產液相色譜系統壓力高時考慮色譜柱堵了,如果將液相色譜換成兩通壓力依舊高,考慮系統管路某部分堵了。管路堵的情況下可以使用熱水清洗。對堵塞的通道可以用熱水清洗。