 |
上海橋星貿易有限公司
主營產品： 進口透析袋,密理博ECL發光液,B27無血清培養基,Gibco膠原酶 |
11
聯系電話
|
上海橋星貿易有限公司
主營產品： 進口透析袋,密理博ECL發光液,B27無血清培養基,Gibco膠原酶 |
聯系電話
2023-5-15 閱讀(1915)
細胞培養培養板的操作步驟如下：
1.加樣品：將標本稀釋液100ul(或2滴)加到包被板內(預留陰陽性及空白對照2-5孔)，將待檢血清用PBS或生理鹽水按1：20稀釋后取10ul加入反應孔內。
2.加對照：加入陰性對照1-3孔，陽性對照1孔，各100ul對照血清。空白對照1孔空置。
3.溫育：將反應板震蕩使樣品混勻后，置37℃溫箱或水浴反應20分鐘。
4.洗板：用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。(1)手洗：將反應板孔內容物傾出，將洗滌液注滿反應孔，放置30秒鐘后用力甩去，如此重復5次后拍干。(2)機洗：5次，每孔注入洗滌液200ul或注滿，停留30秒鐘后吸盡拍干。
5.加酶標工作液：每孔加入100ul(或2滴)酶標工作液，置37℃溫箱反應20分鐘后，洗板5次，洗板操作同步驟4。
6.顯色和終止反應：將底物A、B液各50ul(或1滴)加到反應孔內，37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul(或1滴)混勻終止反應。
結果判定
1.酶標儀設定波長450nm，先用空白調零，然后測定各孔OD值;如果選用雙波長測定，不必設置空白對照孔。
2.當陰性對照平均OD值小于0.08，陽性對照(pc)OD值大于0.30時，說明試劑盒有效且實驗操作正確，否則應當重復試驗。
3.臨界值(CUT—OFF VALUE)=0.15+陰性對照平均(NC)OD值(當陰性平均OD值小于0.05時，按0.05計算;當陰性平均OD值大于或等于等于0.05時按實際值計算)。
4.標本OD值≤臨界值為陰性，標本OD值>臨界值為陽性。
常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量：不同孔板所加培養液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
| 貨號 | 貨號 | 品名，參數，規格，包裝 |
| SPL- | 92308 | 八道吸液吸頭，非滅菌，散裝， 50個/箱 |
| SPL- | 92108 | 八道吸液吸頭，滅菌，單獨包裝 25個/箱，1個/包 |
| SPL- | 92208 | 八道吸液吸頭，滅菌，單獨包裝 50個/箱，1個/包 |
| SPL- | 80010 | 白鼠盒 PS 183x97x33mm 1個/箱 |
| SPL- | 34396 | 儲樣板，PP，96孔，0.4ml，圓底，非滅菌，透明，10個/包，10包/箱 |
