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吸光度原理

l 吸光度：當入射光頻率與物質(zhì)分子的震動頻率一致，或者入射光引起物質(zhì)分子電子能級躍遷，都會產(chǎn)生光學吸收現(xiàn)象。溶液的濃度越高，穿過溶液的分子也會相應地被吸收越多。

l 其他：入射光透過物質(zhì)沒有發(fā)生任何反應或者變化，直接透過的光即為透射光。彈性散射的發(fā)生會引起光改變方向，但是不會引起波長或者能量的變化，反之則為非彈性散射。

吸光度與透過率關(guān)系

l 測試樣品的透過率

l 透過率為透過光強度與原始光強的比值

如何根據(jù)您的應用選擇不同的采樣附件是至關(guān)重要的。這其中就包括您需要考慮您的樣品是液體的還是氣體的；樣品的光學密度如何；是要原位測試，還是過程控制，或者是在一個反應腔室內(nèi)。從應用出發(fā)進行附件篩選，海洋光學為您提供眾多附件選擇，從簡單的實驗室應用（比如比色皿和比色皿支架）到復雜的采樣工具（比如透射探頭和流動注射裝置等等）。

如何確定未知樣品的濃度

l Lambert-Beer定律是一個線性方程

l 使用已知濃度的標準溶液測試其吸光度值

l 吸光度值和濃度之間可以建立一條線性關(guān)系的標準曲線

l 最后通過測量未知樣品的吸光度值，從線性關(guān)系曲線中讀取該樣品的濃度值

吸光度測量

基于吸光度的簡單實現(xiàn)與易使用，吸光度被廣泛運用于液體和氣體的光譜測量技術(shù)中。吸光度光譜可以對物質(zhì)進行定量鑒別或者對物質(zhì)進行指紋認證，亦或可以對溶液中的分子進行濃度定量分析。

吸光度測量可以以多種形式呈現(xiàn)。或針對液體或?qū)怏w，而且還可以將該應用集成到工業(yè)應用環(huán)境和客戶所關(guān)注的測試中。樣品不再僅僅使用比色皿作為載體，流動池、浸入式探頭、微量進樣器、氣體存儲皿、微量比色皿等等都可以作為采樣裝置。

使用模塊化光譜儀，我們可以針對特定的吸光度測量來選擇不同波長范圍和分辨率的光譜儀，而且還能在實驗室或者現(xiàn)場對整套光學測量裝置進行快速、方便地更改。事實上，基于海洋光學強大的光譜儀、光源和采樣附件的產(chǎn)品線和靈活易用的搭配，可以針對不同的吸光度試驗搭配出N中選擇。

吸光度測量的附件選擇

如何為您的吸光度測量選擇合適的采樣附件？以下提供一些參考：

測量使用環(huán)境與地點？更精確地說，什么樣的附件能滿足您的現(xiàn)場和實驗室，并且方便易用？如果測試樣品能很簡單地使用比色皿或者試管進行測量，那選擇就可以擴展到比色皿支架（圖1）或者其他支架類產(chǎn)品。如果需要進行實時的原位測量，或者流動液體的測量，可以選擇透射形浸入式探頭（不同光程可選）（圖2）或者流動池（圖3）等等。

l 樣品的性狀：液體還是氣體？由于氣體的特性，我們要么選擇高濃度樣品，要么選擇長光程容器進行測量。根據(jù)不同的樣品，10cm光程的容器一般都足夠了，比如CUV-UV-10（圖4），或者使用準直透鏡直接接觸到樣品中進行測試。

l 測試樣品的光學密度如何？光學密度OD值直接影響您對測試樣品不同光程容器的選擇。光學密度越高，所需要的光程就越短。比如，SpecVette™作為高濃度樣品的理想配件，它的光程可以短至250µm，另外還有1cm和10cm的標準配件可選。另外一方面，低OD的樣品需要長光程配件，比如可以擴展到500cm的長光程流通池（圖3）就是比較好的選擇。如果您需要了解更多樣品濃度與光程之間的關(guān)系信息，請參考比爾-朗博定律的具體介紹。

l 樣品的體積如何？測量樣品的體積也影響采樣附件的選擇。針對低于2uL的微量樣品，可以選擇微量比色皿（圖5）和微量取樣器（圖6）

針對連續(xù)流動的樣品怎么選擇？形流動注射裝置（圖7），毛細管電泳池（圖8），還包括那些可以使用泵裝置/塑料套管連接的裝置（圖9）都是流動樣品測量吸光度的選擇。 

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