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血清25-羥基維生素D2和D3檢測 同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法
閱讀：434發(fā)布時間：2025-1-13
引言
Restek
維生素 D 是一種脂溶性維生素,它對維持人體鈣、磷代謝平衡起著重要作用。維生素 D 以維生素 D2 和維生素 D3兩種形式存在，它們分別經(jīng)過代謝形成 25-羥基維生素 D2 和 D3，這兩種代謝物是評估維生素 D 代謝的生物標志物。
缺乏維生素 D 會導(dǎo)致鈣吸收障礙，從而引發(fā)骨質(zhì)疏松、肌肉無力、骨折等健康問題，因此臨床實踐中對維生素 D 的檢測需求急劇增加。
對此，2024 年 5 月，國家衛(wèi)健委發(fā)布了衛(wèi)生行業(yè)新標準《血清 25-羥基維生素 D2 和 D3 的檢測同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》，該標準將于 2024 年 11 月 1 日起實施！
01
Restek 解決方案
該標準中推薦的色譜柱為五氟苯基柱或 C18。由于 25-羥基維生素 D2 和 D3 的差向異構(gòu)體（ 3-EPI-25-羥基維生素 D2 和 D3），對 25-羥基維生素 D2 和 D3 的總濃度有顯著貢獻，而這兩種差向異構(gòu)體的生物活性遠低于主要代謝物;因此，必須在色譜上將 25-羥基維生素 D2/ D3 與它們的差向異構(gòu)體分離，才可以避免維生素 D 檢測水平偏高問題的出現(xiàn)。
使用 C18 色譜柱的限制主要是：生物標志物及其差向異構(gòu)體不能全分離或分析時間比較長。Raptor PFPP 可以在 5 分鐘內(nèi)全分離維生素 D 的生物標志物和差向異構(gòu)體，因此是這個應(yīng)用的更好選擇。
Restek 色譜圖 LC_CF0644
色譜條件 | |
色譜柱 | Raptor FluoroPhenyl (cat.# 9319A1E) |
規(guī)格 | 100 mm x 3 mm ID |
粒徑 | 2.7 μm |
柱溫 | 30 ℃ |
樣品 | |
溶劑 | 水 : 甲醇 = 50 : 50 |
濃度 | 25-50 ng/ mL |
進樣量 | 5 μL |
流動相 | A：水（0.1% 甲酸） B：甲醇 |
時間(min) | 流速(mL/min) | %A | %B |
0.00 | 0.6 | 25 | 75 |
4.00 | 0.6 | 15 | 85 |
4.10 | 0.6 | 0 | 100 |
5.00 | 0.6 | 0 | 100 |
5.01 | 0.6 | 25 | 75 |
7.00 | 0.6 | 25 | 75 |
檢測器 | MS/MS |
離子化方式 | ESI+ |
掃描方式 | MRM |
儀器 | HPLC |
02
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