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液相色譜柱的保護

閱讀:616發布時間:2021-11-8

  1. 液相色譜柱的平衡
 
  反相液相色譜柱在乙腈/水中保存,經工廠檢驗。柱應用甲醇或乙腈柱體積的10-20倍洗滌。請確保在樣品分析中使用的流動相和乙腈/水是相容的。每天有足夠的時間來平衡液相柱和流動相,您將在處理問題時獲得大的“補償”,您的液相柱的使用壽命將變得更長!業務步驟:
 
  使用流動相平衡液相色譜柱,流速在平衡開始時緩慢增加,直到達到穩定的基線(如果緩沖鹽或離子對試劑的流速較低,則需要較長的時間來平衡)。
 
  如果活性相含有緩沖鹽,則應注意純水的“過渡”,即需要用純水沖刷30分鐘以上才能開始日常分析。分析后,需要用純水清洗柱30分鐘,除去鹽緩沖液,然后用甲醇沖洗柱30分鐘。
 
  2. 液相色譜柱的再生
 
  對于長期液相色譜柱,柱效率往往降低(理論塔板數減少)。液相色譜柱可以再生,在有條件的實驗室中,應該使用廉價的泵來再生色譜柱。
 
  建議用來沖刷柱子的溶劑體積
 
  液相色譜柱的大小。柱體積中所用溶劑的體積。
 
  125-4mm 1.6ml 30ml
 
  250-4 mm 3.2ml 60ml
 
  250-10mm 20ml 400ml
 
  挑選再生辦法:
 
  極性固定相(如Si,NH2* ,DIOL基色譜填料)的再生:   正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
 
  非極性固定相(如反相色譜填料RP-18、RP-8、CN等)的再生:水/乙腈/氯仿(或異丙醇)/乙腈/水
 
  當NH2改性的液相色譜柱再生時,由于NH2可能以銨離子的形式存在,洗滌后應先用0.1M氨洗,再用水洗,直至堿液*排出。
 
  0.05M稀硫酸可用于凈化被污染的液相色譜柱。如果有機溶劑/水的簡單處理不能*去除吸附在硅膠表面的雜質,則洗滌后用0.05m的稀硫酸進行洗滌是非常有效的。
 
  3. 液相色譜柱的保護
 
  用柱前保護分析柱(硅膠在極性活性相/離子活性相中有一定的溶解度)
 
  大多數反相液相色譜柱的pH穩定尺度為2~7.5,盡量不超過液相色譜柱的pH尺度。
 
  防止活動相組成及極性的劇烈改變
 
  活動相運用前有必要經脫氣和過濾處理
 
  如果使用極性或離子緩沖溶液作為活性相,則在測試結束時,色譜柱應清洗干凈,并儲存在甲醇或乙腈中。
 
  氯化物的溶劑對它有一定的腐蝕性。因此,需要注意的是,為了防止腐蝕,柱和連接管在很長一段時間內不能保持這樣的溶劑。
 

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