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固相萃取柱的原理與使用
閱讀：2280發布時間：2020-4-26
在許多的食品、農牧、環境監測、生物等方面都會有需要對樣品進行前處理，都會用到固相萃取柱，那么固相萃取柱的使用原理是什么？又該如何使用呢？
固相萃取柱
固相萃取柱(英文, 簡稱SPE column，或Solid Phase extraction Cartridges，簡稱SPE cartridges)是從層析柱發展而來的一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。主要應用于各種食品、農畜產品、環境樣品以及生物樣品中目標化合物的樣品前處理。固相萃取技術已經被廣泛地使用在許多國標(GB/T)以及行業分析標準中。
固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。對于以硅膠為基質的固相萃取柱，其容量一般在1~5 mg/100 mg，也就是柱容量是填料質量的1%~5%。而鍵合硅膠離子交換吸附劑填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量為X毫克當量。這類填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。
固相萃取柱的使用原理
SPE技術基于液-固相色譜理論，采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、凈化，是一種包括液相和固相物理萃取過程；也可以將其近似地看作一種簡單的色譜過程。SPE是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑，保留其中被測物質，再選用適當強度溶劑沖去雜質，然后用少量溶劑迅速洗脫被測物質，從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質，而讓被測物質流出；或同時吸附雜質和被測物質，再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質。
固相萃取柱的使用步驟
(1)預處理萃取柱。
在萃取樣品之前，為了濕潤固相萃取柱填料，用一滿管溶劑沖洗管子。反相類型硅膠和非極性吸附劑介質，通常用水溶性有機溶劑如甲醇預處理，然后用水或緩沖溶液。甲醇濕潤吸附劑表面和滲透鍵合烷基相，以允許水更有效地濕潤硅膠表面。有時前預處理溶劑使用在甲醇之前。這些溶劑通常是與洗脫溶劑一樣，是用之消除固相萃取管上的雜質及其對分析物的干擾，也可能該雜質只溶于強洗脫溶劑。
正相類型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質，通常用樣品所在的有機溶劑來預處理。離子交換填料將用于非極性有機溶劑中的樣品，其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來預處理。為了使固相萃取填料從預處理到樣品加入時都保持濕潤，允許大約1毫升的預處理溶劑在管過濾片(frit)或萃取片表面之上。如果樣品是從一個貯液管或過濾管引入固相萃取管，則多加入0。5毫升*后的預處理溶劑到1毫升的固相萃取管中，如果是2毫升到3毫升的萃取柱中，多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前萃取柱濕潤。如果在樣品加入之前，萃取柱中的填料干了，重復預處理過程。在重新引入有機溶劑之前，用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。
(2)加入樣品。
將樣品裝入萃取柱，此時，固相萃取小柱中的填料會吸附樣品中所感興趣的化合物或者樣品中的雜質。這樣，當樣品流出時，所選擇的化合物(包括雜質)被留在萃取柱上。
(3)沖洗填料。
用一種強得能洗脫雜質而又弱得能保留感興趣的化合物的沖洗液來沖洗雜質。
(4)洗脫感興趣的化合物。
用溶劑將被吸附在萃取柱上的化合物洗脫在溶液里。
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