島津應用:利用LC-MS/MS 考察 CHO 細胞
細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,為促進細胞生長增殖提供物質基礎,是培養細胞生長和繁殖的生存環境。合成細胞培養基是用化學成分明確的試劑配制的培養基,是目前常用的一類培養基,其組分穩定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。培養基組分的變化,對細胞生長會產生一定影響,如細胞生長形態、分裂速度等。同時,適宜的培養基組成與優選的細胞培養工藝對于提高蛋白類藥物的產率,保證細胞培養批次之間的一致性、穩定關鍵質量屬性等因素至關重要。因此,尋求一類合適的培養基組成,對細胞培養具有重大意義。細胞生長狀態的分析,除形態學觀察外,還可對細胞培養上清液中細胞代謝物進行分析,通過考察細胞上清液中營養物和代謝物的變化,判斷細胞在生長增殖過程中狀態的優劣。鑒于此,我們開發了“細胞培養上清液方法包”,該技術可在 17 分鐘內同時分析 95 種細胞培養上清液營養成份和代謝物的相對豐度變化。
本文使用島津超液相色譜儀 LC-30A 和三重四極桿質譜 LCMS-8060 聯用,結合“細胞培養上清液方法包”建立了細胞培養上清液中營養物質和細胞代謝物的液相色譜-串聯質譜的同時分析方法,為相關研究人員評估細胞生長狀態、改進培養基組分提供參考。
島津三重四極桿質譜 LCMS-8060
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