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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2017-7-10 閱讀(3027)
（1）近半個世紀前，Kivy和Dember等人證明大鼠能辨別T-形迷宮（T-maze）兩臂顏色的變化。他們發現，將雄性大鼠置于T-形迷宮的主干臂 15-30min，讓其能看見、但不能進入黑白兩臂。然后，改變其中一個臂的顏色，使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇T-形臂。結果顯示，大鼠總是選擇改變了顏色的那個臂（新異臂）。這一過程要依靠動物的記憶來完成。由此發展而成的T-形迷宮實驗成為目前用于評價空間記憶的常用的動物模型之一。當然，現在的T-形迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動物探究的動力。通常用這一模型來研究動物的空間工作記憶（spatial working memory），即測定動物只在當前操作期間有用的信息。經改進后的T-形迷宮也可用來評價參考記憶（reference memory），即記錄在這一實驗中一天、一次的測試都有用的信息。
T迷宮是檢測嚙齒類動物空間工作記憶的一種經典行為學方法，與前額葉皮層功能相關。小鼠節食至原體重85％。
（2）實驗設備： 迷宮由兩個長46cm、寬10cm、高10cm的目標臂（goal arms）和一個與之垂直的長71cm、同樣寬度和高度的主干臂（stem）或起始臂（approach alley）組成。主干臂內置一個16cm×16cm的起始箱，并有一閘門與主干臂的另一部分相聯。飲水不限，但進食控制在每天 16-20g，以使體重保持在非進食大鼠體重的85%。在整個訓練和測試期間，大鼠體重每周增加不超過5g。
（3）實驗過程：
①訓練前2 d，撫摸小鼠并將其放入T迷宮適應10min，在迷宮兩臂碗里放入食物，待小鼠取食完畢后將其取出。
②訓練實驗：每一個trial包括兩個部分，即forced run和test run。forced run：選擇T迷宮的一臂，用木閘門將之關閉，小鼠只能進入一臂獲取食物。取食完畢，立即取出，用酒精清洗去除氣味。15 s后，撤去的閘門。Test run：兩臂全部打開，將小鼠放入開始臂中，若小鼠選擇未曾進入的臂，為正確選擇，給予食物獎勵；若重復進入相同的臂，則為錯誤選擇，不給予食物。每只動物每天進行4個trial，每次間隔15min，連續4 d，分別計算每天每組小鼠的正確率。當平均正確率都達到85％以上，訓練階段結束。
③測試實驗：延長forced run和test run之間的時間間隔至1min和3min，分別計算每組小鼠的正確率。
（4） 注意事項：
①大鼠和小鼠具有良好的空間辨別功能，能很快學會并準確操作迷宮。因此，T-形迷宮和放射臂迷宮均被廣泛用于測試動物的空間記憶能力。T-形迷宮用于研究不同腦區對空間記憶的影響。它對某些腦結構，尤其是海馬的毀損作用敏感。此外，許多藥物或毒素都可增強或削弱動物在T-形迷宮的空間記憶。實驗所用的動物除大鼠和小鼠外，還包括豬、羊、烏龜等。
②動物選擇的準確性與兩次選擇之間的間隔及每一訓練間期內的選擇訓練次數等有關。正常動物經短時間的間隔（例如5s），其選擇準確性非常高。而經過極長時間的間隔（例如超過1h），其選擇接近隨機性操作。強迫選擇訓練后。如只給一次目標臂選擇，準確性通常很高。但是，如給予多次選擇，則選擇次數越多，準確性越差。
③嚙齒類動物有單向偏愛的特性。這種單向偏愛與動物種屬和品系有關。例如，C57BL/6J小鼠、ICR小鼠和Purdue-Wistar大鼠更偏愛左側，而Spague-Dawley大鼠和Wistar大鼠更偏愛右側。研究表明，超過2/3的雄性Spague-Dawley大鼠偏愛右側，而偏愛左側的不到1/5。這種單向偏愛可影響對動物學習記憶的評價。
④主干臂的閘門是T-形迷宮的重要特征。它既可用于在兩次選擇之間將動物限制在起始箱內的時間，也可防止動物在兩次選擇訓練之間探究迷宮。因此，兩次選擇訓練之間應將動物迅速放回主干臂內的起始箱。這一點很重要，它可動物不會去探究對側目標臂。
⑤當動物對迷宮或實驗者的應激恐懼超過其對探究和覓食的渴望程度時，動物對迷宮的探究減少，甚至呆在迷宮某處不動而不去探究迷宮。這種恐懼表現為 動物在迷宮內排便和排尿；當抓它時，動物還會發出尖叫聲。因此，足夠的應激適應是的。否則，如果動物在迷宮內不進行臂的選擇，就無從得知它的記憶力是 正常還是減弱。
