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注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數規格:
產品名稱:灰馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒哪家代理
英文名稱:Madurella griseaPCR
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。?
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產品僅用于科研按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
灰馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒哪家代理原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
玉米素/植物細胞分裂素/6-(4-羥基-3-甲基-2-丁烯基)氨基嘌呤/ZT/Zeatin植物細胞培養級,99%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13114-27-72~8℃,避光
反玉米素/反式玉米素/6-反式-4-羥基-3-甲基-丁-2-烯基氨基嘌呤/(E)-6-(2-甲基-4-羥基-2-丁烯-1-氨基)嘌呤/Trans-Zeatin植物細胞培養級,99%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1637-39-42~8℃,避光
脫落酸/S-誘抗素/壯芽靈/2-順式,4-反式-5-(1-羥基-4-氧代-2,6,6-*基-2-環己烯-1-基)-3-甲基-2,4-戌二烯酸/(+)-脫落酸/天然脫落酸/(S)-5-(1-羥基-4-氧代-2,6,6-*基-2-環己烯-1-基)-3-甲基-(2Z,4E)-戊二烯酸/脫落素Ⅱ/休眠酸/休眠素/落葉酸/ABABR,90%500毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14375-45-22~8℃,避光
腺嘌呤/腺素/6-氨基嘌呤/胰堿/腺堿/腺尿環/6-氨基尿環/1H-嘌呤-6-胺/Adenine高純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,73-24-5RT,避光
腺嘌呤硫酸鹽/硫酸腺嘌呤/硫酸腺素/硫酸-6-氨基嘌呤/1H-嘌呤-6-胺硫酸鹽/硫酸胰堿/Adenine sulfate高純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,321-30-2RT,避光
腺嘌呤鹽酸鹽/鹽酸腺素/鹽酸-6-氨基嘌呤/維生素B4鹽酸鹽/鹽酸胰堿/Adenine hydrochloride高純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6055-72-7RT,避光
磷酸腺嘌呤/維生素B4/腺嘌呤磷酸鹽/6-氨基嘌呤磷酸鹽/磷酸腺素/維他命/磷酸氨基嘌呤/1H-嘌呤-6-氨基磷酸鹽/Adenine phosphate/VB40.985克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,70700-30-0RT,避光
矮壯素/氯化氯代膽堿/稻麥立/氯化-2-氯-N,N,N-*基乙胺/三西/西西西/2-氯-N,N,N-*基乙銨氯化物/(2-氯乙基)*基氯化銨/氯化矮壯素/2-氯乙基*基氯化銨/二氯膽堿/氯化氯膽堿/氯化*基(2-氯乙基)銨鹽/Chlormequat chlorideBR,98%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,999-81-5RT
28-表高油菜素內酯/蕓苔素內酯/油菜素內酯/油菜素甾醇/(22R,23R,24S)-2α,3α,22,23-四羥基-24-乙基-5α-膽甾-6-酮/天豐素/(22R,23R,24R)-2Α,3Α,22,23-四羥基7-氧雜-54-麥角甾烷-6-酮/農樂利/噴長精/益豐素/油菜素甾醇內酯/油苔素內酯/Brassinolide高純,95%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,80483-89-22~8℃
6-芐氨基嘌呤/細胞分裂素/N-芐基腺苷/6-芐基腺嘌呤/2-芐氨基嘌呤/6-(N-芐基)氨基嘌呤/6-苯甲基腺嘌呤/6-芐腺嘌呤/6-BA高純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1214-39-7RT
6-糠氨基嘌呤/激動素/動力精/6-呋喃甲氨基嘌呤/6-糠基氨基嘌呤/N-(2-呋喃甲基)-6-氨基(1H)嘌呤/N6-呋喃甲基腺嘌呤/6-KT高純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,525-79-1RT
6-氯嘌呤/6-氯代嘌呤/6-CP高純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,87-42-32~8℃
6-巰基嘌呤一水合物/6-硫代嘌呤/巰嘌呤/樂疾寧/6-巰嘌呤/6-巰基單酯/嘌呤-6-硫醇/6-MP特純,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6112-76-1RT
嘌呤/尿(雜)環/四氮雜茚/7H-咪唑(4,5-d)嘧啶/咪唑并嘧啶/嘌呤堿/Purine特純,98.5%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,120-73-02~8℃
灰馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒哪家代理3-Hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-one 質量規格:>98%,BR
N-Fmoc-N'-trityl-L-histidine 質量規格:>98%,BR
Magnesium hydroxide 質量規格:>98%,BR
3,4-Dimethyldiphenylamine 質量規格:>98%,BR
1-(2-Deoxy-2-fluoro-beta-D-arabinofuranosyl)uracil 質量規格:>98%,BR
Herbacetin 7-rhamnoside 質量規格:>98%,BR
N-(2-Acetamido)iminodiacetic acid monosodium salt 質量規格:>98%,BR
4-Bromothioanisole 質量規格:HPLC>98%,標準品