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細菌亮發(fā)光桿菌檢測方法解析

閱讀:869      發(fā)布時間:2017-8-16
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亮發(fā)光桿菌是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態(tài)極其微小,用常規(guī)微生物計數(shù)法無法測得其數(shù)量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們再擴散和侵染周圍細胞,zui終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細菌的平板上出現(xiàn)肉眼可見的空斑──噬菌斑。了解噬菌體的特性,快速檢查、分離,并進行效價測定,對在和科研工作中防止噬菌體的污染具有重要作用。

檢樣可以是發(fā)酵液、空氣、污水、土壤等(至于無法采樣而需檢查的對象,可以用無菌水浸濕的棉花涂拭表面作為檢查樣品)。為了易于分離可先經(jīng)增殖培養(yǎng),使樣品中的噬菌體數(shù)量增加。

采用微生物測定法進行噬菌體檢測,約需12h左右,因而不能及時判斷是否有噬菌體污染。通過快速檢測可大致確定是否有噬菌體污染,以采取必要的防治措施。根 據(jù)正常發(fā)酵(培養(yǎng))液離心后菌體沉淀,上清液蛋白含量很少,加熱后仍然清亮;而侵染有噬菌體的發(fā)酵(培養(yǎng))液經(jīng)離心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白,加熱后發(fā)生蛋白質(zhì)變性,因而在光線照射下出現(xiàn)丁達爾效應(yīng)而不清亮。此法簡單、快速,對發(fā)酵液污染噬菌體的判斷亦較準確。但不適于溶源性細菌及溫合噬菌體的診斷,對侵染噬菌體較少的一級種子培養(yǎng)液也往往不適用。

噬菌體的效價即1mL樣品中所含侵染性亮發(fā)光桿菌的粒子數(shù)。效價的測定一般采用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,一般一個噬菌體產(chǎn)生一個 噬菌斑,故可根據(jù)一定體積的噬菌體培養(yǎng)液所出現(xiàn)的噬菌斑數(shù),計算出噬菌體的效價。此法所形成的噬菌斑的形態(tài)、大小較一致,且清晰度高,故計數(shù)比較準確,因而被廣泛應(yīng)用。
 SFMC     人可溶性血纖蛋白單體復合物     規(guī)格:    48T/96T
 sVCAM-1     人可溶性血管細胞粘附分子1     規(guī)格:    48T/96T
 sEPCR     人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體     規(guī)格:    48T/96T
 VEGFR-2/sFLK-1     人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2     規(guī)格:    48T/96T
 sAC     人可溶性腺苷酸環(huán)化酶     規(guī)格:    48T/96T
 sCKR     人可溶性細胞因子受體     規(guī)格:    48T/96T
 sICAM-1     人可溶性細胞間粘附分子1     規(guī)格:    48T/96T
亮發(fā)光桿菌

 

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