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傘枝梨頭霉PCR試劑盒的樣品DNA的制備過程是怎樣的

閱讀：1172 發(fā)布時間：2021-11-25

　　傘枝梨頭霉PCR試劑盒采用優(yōu)化的超順磁性磁珠和緩沖體系，可便捷回收PCR產(chǎn)物中的DNA，有效去除引物二聚體、dNTP、無機鹽及蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，整個過程操作簡單快速，20分鐘即可完成實驗。本產(chǎn)品具有回收DNA的片段，回收率高，DNA純度高等特點，回收的DNA可直接用于酶切、測序、PCR等后續(xù)操作。

　　傘枝梨頭霉PCR試劑盒的樣品DNA的制備：

　　1、用自選方法純化樣品的DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

　　2、如果有N個樣品，則需要進(jìn)行N+2個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

　　3、配制溶液A工作液。如果待測樣品數(shù)量為其他數(shù)字，配制的溶液A工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。

　　4、在標(biāo)記好的N+2個離心管中，加入1-5mg固體樣品（半粒芝麻大小）或5uL液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入5uL陽性對照，在樣品制備陰性對照中加入5uL水。

　　5、在每個管中加入100uL溶液A工作液，確保固體樣品被溶液淹埋，如果是液體樣品則震蕩混勻。

　　6、95℃保溫10分鐘。

　　7、待冷卻到常溫后加入10uL溶液B并混勻得DNA釋放液。每個樣品得到的DNA釋放液足夠進(jìn)行50-100次PCR。

　　本試劑盒用于病料組織中病毒的檢測，具有與柱提取方法相當(dāng)?shù)拿舾行裕矣帽驹噭┖锌擅獬M織研磨和核酸提取步驟，加快檢測流程，加大檢測能力，減少實驗室污染。前期研究結(jié)果顯示，對于動物各內(nèi)臟、耳、尾等組織，均不需要研磨而直接裂解。也可以對含有骨髓的骨組織，直接用試劑盒處理和擴增。

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