成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

13611928337

technology

首頁   >>   技術文章   >>   從費氏弧菌發光桿菌提取質粒向大腸桿菌DH10B電轉化方法

上海一研生物科技有限公司

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

從費氏弧菌發光桿菌提取質粒向大腸桿菌DH10B電轉化方法

閱讀:1688      發布時間:2017-7-13
分享:

費氏弧菌發光桿菌制做選擇平板LB+25 mg/l Kan。
②核對好要轉化的質粒dna,在15 ml Falcon tube 和cuvette(電轉化用的石英樣品槽,兩面磨光,兩面磨砂)標好質粒名稱。將Falcon tube、cuvette、質粒DNA、SOC培養基按順序對應置于冰上預冷或解凍。轉化前將大腸桿菌(45 µl aliquot of E. coli DH10B Cells)置于冰上解凍(約3-5 min)。
一、將冰桶移置超凈工作臺上,取200-1000 µl、20-100 µl、0.5-10 µl 移液器(Fubbouoette)到超凈工作臺上。先用0.5-10 µl移液器取0.5-2 µl質粒DNA到大腸桿菌細胞內,再用調節到50 µl 的(20-100 µl移液器)上下吹吸數次。在冰上放置2 min。
二、用調節到50 µl 的(20-100 µl移液器)將質粒DNA和大腸桿菌細胞混合液轉移到電轉化石英樣品槽底凹槽的中央,在桌面上輕擊數次使之分散。在冰上放置1-2 min。
三、先用紙將樣品槽擦拭一下,移到2.5 kV電脈沖發生器上,同時用1000 µl移液器吸好SOC培養基,約4.5-5 sec后鳴叫聲停后,立即加入樣品槽內(吹吸一次或不吹吸)。
四、將細胞懸浮液從樣品槽中取出并加入15 ml Falcon tube,在37℃,200/min振蕩培養1 h。在樣品槽中加滿自來水,以便清洗。
五、在此期間,可制做選擇平板LB+25 mg/l Kan。
六、將培養后的轉化大腸桿菌懸液在超凈工作臺上全部倒入1.5 ml微量離心管,13000 rpm離心30 s(或到達13000 rpm后離心15 s)。用費氏弧菌發光桿菌1000 µl移液器取出大部分的上清,再用50 µl移液器全部棄掉剩余的上清,之后吸取100 µl lb培養基重新懸浮沉淀,上下吹吸數次到均勻。
七、對三角鐵焚燒滅菌,標記選擇平板,取30 µl LB培養基加入平板中心,再取重新懸浮后的轉化大腸桿菌30 µl加入平板中心。待三角鐵冷卻后,在平板上研磨,至無可見液體為止。注意三角鐵一定要冷卻,或先在無菌液的平板上研磨加速冷卻。
八、將選擇平板在37℃下培養,1天后觀察轉化效果。
九、清洗電轉化樣品槽。先用自來水吸瓶沖洗十多次,之后加入酒精,放置1 h,之后用蒸餾水沖洗數次,甩干后,費氏弧菌發光桿菌水平放置在濾紙上晾干。

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 调教人妻中文字幕| 韩国理论电影网| 国产在线精品一区二区在线看| 香蕉久久国产AV一区二区| 69SEX久久精品国产麻豆| 亚州**色毛片免费观看| 精品国产天堂综合一区在线| 护士人妻hd中文字幕| 国产成人AV一区二区三区无码| 久久大香萑太香蕉av| 日本久久精品毛片一区随边看| 精品国产乱码久久久久久免费| 中文字幕韩国三级少妇在线光看| 日韩人妻中文字幕| 日韩精品在线中文字幕| 亚洲AV无码影院在线播放| 无码人妻丰满熟妇啪啪区日韩久久| 亚洲欧洲成人综合久久伊人| 亚洲精品久久99久久一二三区| 丰满熟妇被掹烈进入高清片| av淘宝 在线观看| 欧美国产亚洲精品| 射精品欧美人妻内射| 国产精品福利午夜在线观看| 亚洲熟女乱色综合亚洲图片| 凸凹人妻人人澡人人添| 強奷漂亮少妇高潮A片P夜夜嗨| 男人女人黄 色视频| 天堂男人一区第二区三区四区| 扒开乡村美妇两腿挺进| 久久免费看少妇高潮A片JA小说| 欧美乱妇日本无乱码特黄大片| 在线观看国产高清视频| 国产欧美亚洲精品a国产| 国产极品粉嫩福利姬萌白酱| 欧美精品在线观看一区二区| 欧美日本高清动作片www网站| 久久久久久精品免费免费直播| 成人无码精品1区2区3区免费看| 欧美日韩乱国产无遮挡| 精品久久中文久久久|