1.不去看說(shuō)明書，直接就上機(jī)使用

  色譜柱內(nèi)部保存著什么溶劑一定要看清楚，因此色譜柱的說(shuō)明書一定要看清楚，當(dāng)然也包括說(shuō)明書上建議的維護(hù)保養(yǎng)規(guī)定，對(duì)我們都非常的有用。對(duì)于反相柱來(lái)說(shuō)，溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因?yàn)檎嘀丝梢赃m用正相系統(tǒng)，也可以適用反相系統(tǒng)，因此一定要看清楚，對(duì)于你的方法來(lái)說(shuō)是否需要置換色譜柱內(nèi)部保存溶劑。

2.色譜柱的流向不能改變

  在我們常規(guī)思維中，色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。可是，大家有沒有想過(guò)這個(gè)方向的作用是什么呢？為什么要標(biāo)示一個(gè)使用方向呢？

  其實(shí)色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的，標(biāo)示方向的目的就是讓我們?cè)谑褂弥杏涀×鲃?dòng)相從哪個(gè)方向流入色譜柱，那么這個(gè)流入段就是zui先污染端。這樣就為我們?nèi)蘸缶S護(hù)或再生色譜柱做了準(zhǔn)備，而我們需要遵循這個(gè)規(guī)定應(yīng)該在色譜柱開始做樣后。

  我曾將已經(jīng)污染過(guò)的色譜柱反方向來(lái)使用，如果保留時(shí)間不是很長(zhǎng)，而色譜柱足夠長(zhǎng)，還是能使用一段時(shí)間的。

關(guān)于沖洗：

3.用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈

  使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對(duì)內(nèi)部填料的損傷是zui大的，尤其是純水，除非你的色譜柱是耐水的。沖洗色譜柱的方法是用流動(dòng)相比例的水系和有機(jī)系來(lái)沖洗。如果你認(rèn)為流動(dòng)相比例無(wú)法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過(guò)大，你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來(lái)沖洗。

關(guān)于再生：

4.色譜柱污染后把篩板卸下來(lái)超聲清洗

  對(duì)于色譜柱的污染，*的就是篩板，因此我們zui常用的做法就是把柱頭卸下來(lái)，把篩板拿去超聲清洗。但是我們?cè)诓鹦哆^(guò)程中對(duì)色譜柱前端填料的損害遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于污染照成的傷害，因?yàn)槲覀儾皇菍I(yè)的。因此建議這一步能不做就不做。

5.用異丙醇沖洗再生后，柱子效果更差了

  這種情況我自己就遇到過(guò)，還好那根柱子本來(lái)就打算報(bào)廢了，因此也沒有照成多少損失。但是這是什么原因呢？其實(shí)很簡(jiǎn)單，就是在我反向沖洗前沒有把管路中的污染物沖洗干凈就直接接了柱子。所以說(shuō)，方法是沒有錯(cuò)的，色譜柱受污染時(shí)，我們應(yīng)該先想到儀器也污染了！

關(guān)于保存：

6.保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用

  理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化，但是由于液相色譜柱內(nèi)部保存的有機(jī)系具有揮發(fā)性，因此在使用前還是應(yīng)該用小流速的和色譜柱內(nèi)部相同的溶劑沖洗一定的時(shí)間。可以是0.5ml/min，120min，但咨詢廠家，根據(jù)色譜柱參數(shù)設(shè)定。

7.色譜柱應(yīng)該保存在純乙腈或甲醇中

  色譜柱內(nèi)部保存液具有揮發(fā)性，因此為了減少其揮發(fā)速度，可以添加5%-10%的水，這樣的話可以在一定程度上減少一些有機(jī)系的揮發(fā)。如果再增加一個(gè)保險(xiǎn)，我們可以在堵緊堵頭后，再用封口膜封起來(lái)。同樣道理，色譜柱一段時(shí)間不用后，也應(yīng)該按照第4條，進(jìn)行小流速的沖洗色譜柱。