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凝膠成像技術(shù)

閱讀:2738      發(fā)布時(shí)間:2019-9-6
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定量和定性分析。
凝膠成像系統(tǒng)采用數(shù)碼相機(jī)或高分辨率CCD攝影將攝取的圖像直接輸入計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。在暗箱中的光源燈照射下,通過調(diào)節(jié)變焦光圈、變焦倍數(shù)及焦距使清晰及大小合適。圖像社區(qū)獲得后,通過軟件中圖像處理菜單進(jìn)行調(diào)整和圖像優(yōu)化。以降低圖像本底噪聲。一般經(jīng)過這樣處理后能得到清晰的凝膠圖片。
凝膠成像系統(tǒng)可以對(duì)樣品進(jìn)行定量和定性分析。
凝膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量和定性分析的原理是:光源發(fā)出的光照射樣品,不同的樣品對(duì)光源吸收的量有差異。光密度與樣品濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系,將未知樣品的光密度與已知濃度的樣品皮帶的光密度進(jìn)行比較,可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量,做定量分析。
凝膠成像分析系統(tǒng)定性分析的原理是:由于樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,將未知樣品在圖譜中的位置與標(biāo)準(zhǔn)品在圖譜中的位置相比較,可以確定未知樣品的成分和性質(zhì),做定性分析。

凝膠成像光源分為四種,分別是透射紫外,反射紫外,透射白光,反射白光。

  ①透射紫外:可激發(fā)多種熒光染料。光源波長302nm或365nm。

  ②反射紫外:紫外反射燈源使用并不廣泛,主要是提供非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由于比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源*可以滿足,因此凝膠成像中通常將紫外反射光源作為選配件不列入標(biāo)配中。光源波長254nm或365nm。

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