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硅膠珠型microRNA分離試劑盒

富士膠片和光提供能使從Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列實驗操作簡化的“microRNA純化試劑盒”系列。使用本系列試劑盒能簡便地從人和小鼠的細胞或組織中提取Ago蛋白結合的microRNA以及靶mRNA，還能從培養上清、血清、血漿中提取游離Ago蛋白結合的microRNA。所提取到的RNA可以應用于qPCR、微陣列檢測、NGS等下游實驗。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA純化試劑盒，以及采用了硅膠珠法的microRNA純化試劑盒。

microRNA純化試劑盒抗Ago抗體固定珠子具有非特異吸附性低的特征，它采用二氧化硅基聚合物珠粒，以離心為基礎進行免疫沉淀操作。在從免疫沉淀后的硅膠珠中提取RNA的步驟時，采用苯酚/CHCl3提取（P/C法）及乙醇沉淀來提取RNA。富士膠片和光推出含有固定了抗Ago1抗體（2A7）、抗人Ago2抗體（4G8）、抗小鼠Ago2抗體（2D4）、抗人Ago3抗體（1C12）的硅膠珠的4種試劑盒。

◆操作示意圖

◆試劑盒使用實例

用microRNA純化試劑盒，人Ago2通過Urea-PAGE分離從三種5×10⁶ cells的人培養細胞株（HeLa、HepG2、HEK293），和小鼠培養細胞株（P388D1）中提取的microRNA組分，再進行銀染（311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests）檢測。結果表明能從人培養細胞中特異性提取microRNA（圖1）。以同樣的銀染試劑，檢測用microRNA純化試劑盒，小鼠Ago2從5×10⁶ cells的人培養細胞（HeLa）和嚙齒動物培養細胞株（P388D1、CHO、PC-12）中提取的microRNA組分。結果表明，能從三種嚙齒動物培養細胞株中特異性提取microRNA而不能從人細胞株中提取（圖2）。

圖1.通過用人Ago2提取的microRNA的進行銀染檢測

圖2. 對小鼠Ago2提取的microRNA的進行銀染檢測

◆產品列表

 硅膠珠型microRNA分離試劑盒