氮是烤煙生長過程中重要的營養元素之一，通過生化培養箱低溫培養與研究得出：在烤煙吸收的氮營養中，60% 以上來自于土壤，肥料氮僅占總氮量的35% 左右，因此，提高土壤供氮量對烤煙獲得高產具有重要的實踐意義。自生固氮菌是一類生活在土壤有機質中促進植物生長的根際細菌。本試驗篩選出的固氮菌都屬于自生固氮菌，均為桿菌。蘇云金芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、甲基營養型芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌都是具有固氮功能的細菌。

　　N7 的16S 序列與Bacillus megaterium 相似性達到98%，可推斷這個菌株是巨大芽孢桿菌。巨大芽孢桿菌是一種益生菌，在20 世紀40 年代，巨大芽孢桿菌就已進行實驗研究，學者Sundar、Molla 以及Ellott 等發現以巨大芽孢桿菌為核心制成混合菌劑，可降解難以溶解的含磷化合物。1958 年Hin 在日本分離得一株具有高固氮活性的巨大芽孢桿菌，相對于生物肥料來說，巨大芽孢桿菌具有自身*的優良特點，其生存能力及適應能力較強，對于在非人工氮素供應上這類菌株將起著十分重要的作用。巨大芽孢桿菌不僅具有高效降解煙草中亞硝酸鹽的功能，更有研究表明由巨大芽孢桿菌制成的微生物制劑噴灑在煙草葉片上，能有效的提高葉片的香味，并且降低蛋白質含量，對煙草的品質有很大提高。并且巨大芽孢桿菌與節桿菌雙菌種共同作用能有效提高廢次煙葉的綜合利用和煙草薄片質量，這對煙草企業有巨大的經濟意義。

　　N2、N5、N6、N9、N10 的16S 序列與Bacillussubtilis 相似性達到98%，由此可推斷這幾個菌株是枯草芽孢桿菌。枯草芽孢桿菌是一種益生菌，不僅能夠提高植物種子的發芽率，更具有固氮活性。目前有研究表明，枯草芽孢桿菌是一種內生固氮菌，定殖在宿主植物體內，直接分泌固氮產物給植物吸收，不易受到外界環境條件的干擾，更有利于充分發揮固氮效能，表現出更高的固氮效率。在甘蔗內生固氮菌的研究中，證實了枯草芽孢桿菌和巨大芽孢桿菌的高效固氮活性。English 等研究顯示，煙葉分別或混合接種枯草芽孢桿菌和環狀芽孢桿菌后，能迅速產生一種令人愉悅的香氣。并且研究表明利用枯草芽孢桿菌還可以高效防治煙草青枯病。N1 的16S 序列與Bacillus thuringiensis 相似性達到99%，由此可推斷該菌為蘇云金芽孢桿菌。蘇云金芽孢桿菌不僅常用作微生物殺蟲劑，也具有高效固氮功能。N4、N8、N12 的16S 序列與Bacillusmethylotrophicus 相似性達到99%，由此可推斷這幾個菌是甲基營養型芽孢桿菌，具有高效固氮功能。但是目前對蘇云金芽孢桿菌和甲基營養型芽孢桿菌的固氮功能研究相對較少，這兩個菌種的固氮活性需要做進一步的研究。ARDRA 的分析結果大致一致，證實了我們分類的正確性。

　　本試驗對巨大芽孢桿菌的適宜培養條件、適pH 值等進行了研究。把蔗糖作為N7 的碳源進行下一步的研究。與蔗糖相比，葡萄糖屬于單糖，一般較容易被細菌利用，但在其代謝過程中產酸速度較快，從而使得培養基pH 值快速降低，這可能是導致其生長量較蔗糖低的主要原因。N7 快速生長的初始pH 值為7.50，菌株在中性或偏堿性的條件下生長好，這與文獻報道的植物生長促生菌的適宜培養條件一致。在低溫培養中，N7 的適生長溫度是30℃，可能是由于較低的溫度（25℃），菌體新陳代謝較慢，導致菌生長和分裂速度受影響；較高的溫度（40℃），由于該溫度超過了菌體內酶的適溫度，使得其催化效率有所下降，從而影響了細菌的生長。