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青島捷世康生物科技有限公司
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雙縮脲鑒定蛋白質

時間:2015-9-8閱讀:1331
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雙縮脲鑒定蛋白

蛋白質分子中含有許多肽鍵,與雙縮脲結構相同,在堿性溶液中能與銅離子結合紫色的化合物(稱雙縮脲反應)在一定濃度范圍,顏色的深淺與蛋白質濃度生正比,故可用比色法測定蛋白質的含量,含有兩個以上的肽鍵物質才有反應,故氨基酸無此反應。雙縮脲反應是指具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應,生成紅紫色的絡合物.所有的蛋白質均有此顯色反應.雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發(fā)生紅紫色顯色反應的試劑.它是NaOH和CuSO4兩種溶液鑒定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在堿性環(huán)境下的Cu2+與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質的存在。配位化合物(coordination compound)簡稱配合物,也叫錯合物、絡合物,為一類具有特征化學結構的化合物,由中心原子或離子(統(tǒng)稱中心原子)和圍繞它的稱為配位體(簡稱配體)的分子或離子,*或部分由配位鍵結合形成. 雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物。在強堿性溶液中,雙縮脲與二價銅離子形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵,或能夠以一個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。此法的優(yōu)點是較快速 ,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,以及干擾物質少。主要的缺點是靈敏度差,不適合微量蛋白的測定。

    

          



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