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小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒試驗操作步驟

時間:2014-12-30閱讀:1533
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【青島捷世康】小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒操作步驟

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒用于測定小鼠血清、血漿以及相關液體樣本中抑制素b的含量。

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒試驗操作步驟

1  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒2-8度保存環境中取出需要在實驗室常溫環境中做溫度平衡處理15-20分鐘,與小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒實驗器具及樣本保持溫度一致后方可使用.以免造成數據不準確.

2  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為360μg/ml,240μg/ml ,120μg/ml,60μg/ml, 30μg/ml)。(ELISA試劑盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒))

  • 加樣:在加注各類用品時請用的加樣器,使用前校準加樣器,加樣時間控制在一定時間內5分鐘為宜.樣品較多時用產品推薦排槍.分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  • 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  • 溫育:操作同3。
  • 洗滌:操作同5。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
  • 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

ELISA試劑盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒)

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