一般細胞因子的檢測，都是采用常規的夾心法ELISA檢測，由于因子分子量比力大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不通的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案便是酶標板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標的小分子，然后加樣品，再加不帶標志的檢測抗體，顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高，吸光度越低。病原體抗原的定性與定量，評估自己制備的血清抗體的效價等。
兔ELISA試劑盒中封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。蛋白和非離子型去污劑。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。兔ELISA試劑盒如果試劑稍有不同，則可能需要優化抗體的量。切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。固相載體表面有能被此蛋白質*覆蓋，兔ELISA試劑盒其后加入的血清標本和酶結合物，其中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，zui后產生非特異性顯色而導致本底偏高。
