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青島捷世康生物科技有限公司
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螺旋體染色液(Levaditi銀法)說明書

時間:2024/12/6閱讀:371
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產品簡介:

螺旋體(spirochaeta)是一類細長、彎曲呈螺旋狀、運動活潑的原核細胞型微生物,具有細菌的基本結構,細胞壁有脂多糖和壁酸,螺旋體分為密螺旋體(如梅毒螺旋體)、疏螺旋體(如回歸熱螺旋體)、鉤端螺旋體等;梅毒螺旋體有 8~12均勻的螺旋,兩端尖直;鉤端螺旋體細長,數目較多而且細密,一端或兩端彎曲呈鉤狀,菌體亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋體和鉤端螺旋體可用鍍銀法進行顯色,如 Levaditi 法、Warthin-Starry 法。

螺旋體染色液(Levaditi 銀法)是利用螺旋體具有的嗜銀性,在一定條件下螺旋體可從銀液中吸附銀離子,經還原液處理后,螺旋體內吸附的銀離子被還原為黑色的金屬    銀而顯色,主要用于顯示梅毒螺旋體,亦可顯示鉤端螺旋體,但較少顯示熱回歸螺旋體,對肝臟梅毒樹膠腫和肝臟鉤端螺旋體具有鑒別作用。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考):

1、組織切片厚度1~2mm 為佳,置于10%福爾馬林中固定2~4天。

2、流水沖洗過夜。

3、95%乙醇浸泡24h,蒸餾水浸洗并不停搖動,直至組織下沉為止。

4、更換新的蒸餾水浸洗 10min。

5、入銀溶液加蓋置于37℃恒溫箱孵育1天,更換新的銀溶液,繼續 37℃恒溫箱孵育2 天。

6、蒸餾水浸洗3次,每次10min。

產品組成:

名稱

規格

3×50ml

 

Storage

試劑(A):銀溶液

2×50ml

RT 避 光

(B): Levaditi 還原液

B1: Levaditi 還原液 A

25ml

RT 避 光

B2: Levaditi 還原液 B

25ml

RT

臨用前,按 B1:B2=1:1 混合,即為 Levaditi 還原液,即配即用。

使用說明書

1 份










7、入配制好的 Levaditi 還原液,加蓋室溫避光孵育2天。

8、蒸餾水浸洗3次,每次 2min。

9、常規脫水透明,浸蠟包埋。

10、切片厚度6~8μm,貼片,烤干。

11、二甲苯或 脫蠟透明液脫蠟 2 次,中性樹膠封固。

染色結果:


梅毒螺旋體、鉤端螺旋體

黑色或棕黑色

背景

淡黃至棕黃色




注意事項:

1、 實驗所用器皿需用硫酸洗液浸泡,洗干凈。

2、 步驟4、5的洗片步驟很有必要,一定要把組織中的甲醛和乙醇充分清除,否則易導致組織內銀鹽的沉淀。

3、 某些細菌和真菌菌絲也會被該染液染成黑色,應注意螺線體為螺旋狀形態,并加以鑒別。

4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。    

5、 試劑開封后請盡快使用,以防影響后續實驗效果。

 

有效期:12個月有效。



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