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青島捷世康生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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全能核酸酶

時(shí)間:2020/8/21閱讀:1944
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產(chǎn)品描述

     全能核酸酶,又稱廣譜核酸酶,英文名稱Benzonase Nuclease,一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割,將核酸*消化成3-8個(gè)堿基長(zhǎng)度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。

    本產(chǎn)品由經(jīng)基因工程改造的真核生物酵母菌表達(dá)純化所得,不含原核生物表達(dá)體系自身的細(xì)菌內(nèi)毒素,不僅應(yīng)用在科研研究中,作為培養(yǎng)細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液去粘度的酶制劑,去除核酸干擾提高后續(xù)蛋白純化或功能研究;而且應(yīng)用在疫苗工業(yè)、蛋白和多糖類制藥工業(yè),去除宿主殘留核酸,大大降低疫苗和蛋白類產(chǎn)品核酸污染至皮克級(jí)別,提高制品生物功效。

    本品以無菌液體酶的形式提供,儲(chǔ)存于緩沖液(20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油)中,無色透明液體。


產(chǎn)品性質(zhì)

 

英文別名(English Synonym)

BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease

CAS號(hào)(CAS NO.)

9025-65-4

分子量(Molecular Weight)

27.9 kDa

純度(Purity)

≥90%(SDS-PAGE)

酶活(Enzyme Activity)

≥250 U/μL

比活(Specific Activity)

≥1.0×106  U/mg蛋白

蛋白酶(Protease)

Undetected

內(nèi)毒素(Endotoxin)

Undetected(鱟試劑法)

適pH(Optimum pH)

8.0(工作范圍pH 6-10)

適溫度(Optimum Temperature)

37℃(工作范圍0-42℃)

輔助因子(Cofactor)

1-10 mM Mg2+

儲(chǔ)存緩沖液(Storage Buffer)

20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油

稀釋緩沖液(Dilution Buffer)

20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl

活性單位定義(Unit Definition)

在37℃,pH 8.0反應(yīng)條件,2.625 mL反應(yīng)體系中,在30 min內(nèi)

使△A260吸收值變化1.0(相當(dāng)于*消化37 μg鮭魚精DNA

成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個(gè)活性單位(U)。

 

使用方法

1)細(xì)胞處理:a.貼壁細(xì)胞去除培養(yǎng)基,用PBS洗后,1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-2 μL全能核酸酶,室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

b.懸浮細(xì)胞離心收集后,在離心管中加1 mL RIPA裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-2 μL全能核酸酶,室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

2)組織樣品:將30-100 mg動(dòng)物或者植物組織研磨充分后,加入100-200 μL裂解液,同時(shí)加入加0.5-1 μL全能核酸酶,室溫或冰上孵育5-30 min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

3)大腸桿菌或者其他細(xì)菌:細(xì)菌離心收集后,用裂解液裂解或者研磨破碎后,每1 mL加0.5-1 μL全能核酸酶,室溫孵育30 min,收集裂解液,離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

注:若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應(yīng)適當(dāng)增加酶量或孵育時(shí)間。


運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期2年。若是打開包裝后并4℃放置超過一周,建議過濾除菌防止微生物污染。


注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

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