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阻濕態微生物穿透測試儀操作步驟有哪些

2020-10-28  閱讀(1055)

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阻濕態微生物穿透測試儀測定材料在經受機械摩擦時阻液體中細菌穿透的性能(經受機械摩擦室對液體攜帶細菌穿透的屏蔽性能);主要用于醫療手術單、手術衣和潔凈服等。

符合標準:

YY/T0506.6、EN ISO 22610

技術參數:

1、轉盤速度60rpm±1rpm

2、試驗指對材料的壓力3N±0.02N

3、外向輪轉速5~6rpm

4、定時器設定范圍0~99.99min

5、內外環砝碼總重:800g±1g

測試原理:

進行檢測時,先將試件放于瓊脂培養皿上,一片相同規格的菌片放于試件上面,再蓋上一片厚約10微米的高密度聚乙烯膜,用錐形鋼環將三層材料(試驗材料在下,菌片居中,高密度聚乙烯膜在上面)卡在一起,將此環套件置于轉盤上的瓊脂培養皿上,試驗指以能在整個培養皿表面上移動的方式作用于材料,使材料受到壓力和摩擦的綜合作用,以此模擬在實際應用過程中屏障材料可能發生的受力情況和濕態條件下的微生物穿透。菌片上的微生物穿透試驗材料后會遷移到瓊脂培養基表面,通過對瓊脂培養皿的培養和菌落計數,可對試驗材料的穿透性能進行定量評價。

操作步驟:

1、菌片制備

金黃色葡萄球菌ATCC29213在胰酶大豆瓊脂上36℃±1℃下培養18-24h,將2-3個菌落接種至3ml胰酶大豆肉湯中,在36℃±1℃下培養18-24h。用蛋白胨水1:10稀釋至濃度為1×104CFU/mL~4×104CFU/mL,對后面菌懸液進行計數。

打開無菌袋取出仍貼附在智商的聚氨酯膜,將載菌材料片的可浸濕聚氨酯膜面朝上放在潔凈度盤子上,為了便于操作,用雙面膠帶將載菌材料片的四角固定于盤子上。用培養皿蓋作為模板在載菌膜上化出一個相應的區域,在該區域涂布1.0ml金黃色葡萄球菌懸浮液,然后將菌片至于56℃干燥大約30min,在干燥期間采用消毒的玻璃涂布器在載菌膜上繼續涂布菌懸液,以使菌液均勻分布。

菌片制備好后當日使用。

2、狀態調節

如需要,按照GB6529對試件進行狀態調節,也可在標準正常室溫條件下進行狀態天界和試驗。狀態調節的方法應記錄在試驗報告中。

3、試驗設定

調節控制桿上配重,使試驗指施加到瓊脂上的力值為3N±0.02N。

將*個瓊脂培養皿放在轉盤上。

4、材料應用

用下列計數:采用一個由內、外環組成的圓形砝碼,總重800g±1g對材料施加標準的繃緊力。將圓柱放在內環中央,再將試件覆蓋在圓柱體和內環上,將除去貼附紙后的菌片染菌面向下放在試件上。后在聚氨酯膜上覆蓋一層HDPE膜,向下推緊外環,使三層材料牢固的加在兩個環之間。

5、試驗

將上述環組件輕輕搭放在*個去下蓋子的瓊脂培養皿上,鋼環自由懸放于旋轉盤的外面,將試驗指置于皿口內測的HDPE膜上,這樣試件可與瓊脂表面接觸。試驗指按上述規定施加3N壓力,是儀器運行15min。

15min后立即取下環套件放在一邊。

從旋轉盤上取下*個培養皿并放上皿蓋。馬上將第二個培養皿和環套件放在旋轉盤上。

對后面的四個培養皿用同一個環套組件執行上述步驟。

五個培養皿完成試驗后,取下菌片并棄去,將試件反轉,上面朝下用HDPE膜覆蓋。

在第六個培養皿上操作15min,即完成*個平行試驗組。

其余4片試件同樣按上述方法各運行六個培養皿各15min,每片試件使用一片新鮮制備的菌片。

如果瓊脂表面聚有液體,將其置于潔凈臺上干燥,將各瓊脂培養皿加蓋置于36℃±1℃培養48h。

計數每只培養皿中金黃色葡萄球菌菌落數,培養皿中心15min半徑區域內的菌落數不計。

如果右一個皿或多個皿的計數大于750CFU(不包括上述的培養皿中心15min半徑區域內的菌落數),可重新驚醒試驗。如果重新試驗仍有一個或多個皿計數大于750CFU,表明該材料不可能具有足夠的屏障特性,可終止試驗。

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