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戴安液相色譜柱需要注意的地方
戴安液相色譜柱需要注意的地方
戴安液相色譜柱的使用和維護十分重要，液相色譜柱使用是否得當，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。
戴安液相色譜柱的正確使用：(1)柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度，必須防止較強的機械振動，以免柱床產生空隙。(2)如果儀器用來做常規分析，樣品種類有限，但分析次數多，則不妨為每一類常 規分析配置一根柱，這樣有助于延長柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動，溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況，柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因 此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
戴安液相色譜柱應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變為全部是水，反之亦然，如使用柱溫控制裝置時，應注意在通人流動相后才能升溫，一般說來戴安液相色譜柱不能反沖，只有生 產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效，選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使 流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換，經常用強溶劑沖洗戴 安液相色譜柱，清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50-75mL，保存戴安液相色譜柱時應將柱內充 滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置或更長時間。
戴安液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進人柱內，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷， 死體積增大，在完成分離分析工作之后，不應立即停機，需及時對色譜分析系統進行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內的雜質。
由于懸浮在樣品或流動相中的細小顆粒會堵塞戴安液相色譜柱兩端的篩板，因此在進行色譜分離前，應保證樣品和所用的流動相具有較高的潔凈度。樣品在進樣前應對其進行簡單的針筒過濾；流動相的純度至少應該 達到分析純，推薦使用色譜純的試劑。在對樣品進行分離前必須對流動相樣品的pH值進行測試，確保流動相的pH值應在色譜柱允許范圍內，不至于造成基質的流失和塌陷。當必須要在pH值適用范圍的邊界（特別是pH值 在8.0~10.0時）條件下使用液相色譜柱時，每次使用結束后應立即用適合于戴安液相色譜柱保存并與所使用的流動相互溶的溶劑淋洗，并*置換掉原來所使用的流動相。