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BC0020-丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒
  • BC0020-丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時間:2025-03-23 21:00:07

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丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。
MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有吸收峰,進(jìn)行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸

丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒

  MDA 提取: 1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 

丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒

測定步驟: 1、吸取 0.6mL 試劑一于 1.5mL 離心管中,再加入 0.2mL 樣本, 混勻。 2、95℃水浴中保溫 30min(蓋緊,防止水分散失),置于冰浴中冷卻,10000g,25℃,離心 10min。 3、吸取上清液于 1mL 玻璃比色皿中,測定 532nm 和 600nm 處的吸光度,記為 A532 和 A600, ΔA= A532-A600。

丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒

MDA 含量計算: 1、血清(漿)中 MDA 含量的計算: MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷V 樣=25.8×ΔA 2、細(xì)菌、細(xì)胞或動物組織中 MDA 含量計算(1)按照蛋白濃度計算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(Cpr×V 樣)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外測定,建議使用本公司 BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。(2)按照樣品質(zhì)量計算 MDA 含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(W ×V 樣÷V 樣總)=25.8×ΔA ÷W (3 ) 按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計算: MDA 含量(nmol/104 )=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.0516×ΔA V 反總:反應(yīng)體系總體積, 8×10-4 L;ε:丙二醛摩爾消光系數(shù),155×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.2 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500 萬。

 

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