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蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒
貨號 :PC0020
規格 :500 微孔(500T)
保質期 :有效期 1 年。
產品內容 :
包裝(500微孔) | 保存 | |
BCA 試劑 | 100ml | 室溫 |
Cu 試劑 | 3ml | 室溫 |
PBS 稀釋液 | 30ml | 室溫 |
BSA 蛋白標準 (5mg/ml BSA) | 1ml | -20℃ |
產品簡介 :
堿性條件下,蛋白將Cu 2+ 還原為 Cu + , Cu + 與 BCA 試劑形成紫藍色的絡合物,測定其在 562nm 處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑 SDS,Triton X-100,Tween 不影響檢測結果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明 :
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液:根據標準品和樣品數量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內穩定。
2. 稀釋標準品:取 10 微升 BSA 標準品用 PBS 稀釋 100 微升(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為 0.5mg/ml。將標準品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到 96 孔板的蛋白標準品孔中,加 PBS 補足 20 微升。
3. 將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋) ,加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線 1/2 后。
4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液,37℃放置 15-30 分鐘。用酶標儀測定 A562nm,根據標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應注意防止因水分蒸發影響檢測結果。
二. 分光光度計法
如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。
步驟如下:
1. 配制工作液: 根據標準品和樣品數量,按 50 體積 BCA 試劑加 1 體積 Cu 試劑(50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA 工作液室溫 24 小時內穩定。
2. 稀釋標準品:取 100 微升 BSA 標準品用 PBS 稀釋 1ml(樣品一般可用 PBS 稀釋) ,使終濃度為0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml 離心管,標上號,按下表加入試劑。 4. 37℃放置 15-30 分鐘。用分光光度計測 562nm 處吸光值,根據標準曲線計算出蛋白濃度。
注意事項 :
1. 長期不用時,Cu 試劑與 PBS 稀釋液可置于 2-8℃保存,如發現細菌污染則應丟棄。BCA 試劑在低溫條件下出現結晶沉淀時,可 37℃溫育使其*溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質時,請采用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒訂購說明:
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蛋白定量試劑 BCA蛋白濃度測定試劑盒運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。