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CA1210-細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒
  • CA1210-細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時間:2025-02-21 21:00:07

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細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒
貨號:CA1210
規(guī)格:100T/500T
保存 :4℃密封避光保存,有效期一年。
廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。

細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒

目錄號產(chǎn)品名稱規(guī)格包裝
CA1210-100 Cell Counting Kit-8 100 T1ml
CA1210-500Cell Counting Kit-8 500 T5ml
CA1210-1000 Cell Counting Kit-8 1000 T 10ml
CA1210-3000 Cell Counting Kit-8 3000 T 30ml

保存 :4℃密封避光保存,有效期一年。


產(chǎn)品簡介 :
    Cell Counting Kit-8 簡稱 CCK-8 試劑盒,為 MTT 法的替代方法,是一種基于 WST(水溶性四唑鹽,化學名: 2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽) 的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗


使用說明 :
一 、 制作標準曲線 ( 測定細胞具體數(shù)量時)
    1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,然后接種細胞。
    2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做 3-5 個細胞濃度梯度,每組 3-6 個復(fù)孔。
    3、接種后培養(yǎng)細胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定 OD 值,制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(X 軸) ,OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(試用此標準曲線的前提是實驗的條件要*,便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時間。 )
二 、 細胞活性檢測
    1、在 96 孔板中接種細胞懸液(100µL/孔) 。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在 37℃,5% CO 2 的條件下) 。
    2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù)) 。
    3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。
    4、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。
    5、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
三 、 細胞增值- 毒性檢測
    1、 在 96 孔板中配置 100 µL 的細胞懸液。 將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時 (在 37 ℃, 5% CO2 的條件下) 。
    2、 向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。 在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間 (例如: 6、 12、 24 或 48 小時) 。
    3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù)) 。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基) ,去掉藥物影響。
    4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。
    5、用酶標儀測定在 450 nm 處的吸光度。
    6、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。


活力計算:.
    細胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[ A(0 加藥)-A(空白)]×100
    A(加藥) :具有細胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
    A(空白) :具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細胞的孔的吸光度
    A(0 加藥) :具有細胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
    細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力


注意事項 :
    ①建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。
    ②白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
    ③當使用標準 96 孔板時,貼壁細胞的小接種量少為 1 ,000 個/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于 2,500 個/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實驗,請先計算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。
    ④如果沒有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測靈敏度高。
    ⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。

CCK-8法與其它檢測法之間的比較

細胞計數(shù)方法 MTT 法  XTT 法 WST-1 法CCK-8 法
形 成 的
formazan 的 水
溶性
差 
產(chǎn)品性狀粉末 2 瓶溶液 溶液 1 瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用無需預(yù)制無需預(yù)制
檢測靈敏度 很高很高高  
檢測時間 較長 較短較短
檢測波長560-600nm 420-480nm420-480nm 430-490nm
細胞毒性 高,細胞形態(tài)*消失很低,細胞形態(tài)不變很低,細胞形態(tài)不變很低,細胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性一般較差 一般  
大批量樣品檢測 可以非常適合非常適合非常適合
便捷程度一般 便捷 便捷 非常便捷

 

相關(guān)產(chǎn)品 :

M1020  MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
P1020  1×PBS,PH7.2-7.4,0.01M,細胞培養(yǎng)級
H1020  Hanks,含鈣鎂,含酚紅(HBSS)
H2045  EBSS(不含鈣鎂,不含酚紅 )
12100  DMEM(H)
S9000  特級胎牛血清
P1400  青鏈霉素混合液(100×)

 

細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


細胞培養(yǎng)試劑CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。

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