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使用DAB顯色試劑盒要先看的知識有哪些?

閱讀:4392      發(fā)布時間:2021-3-26
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  DAB顯色試劑盒由DAB色原、DAB底物緩沖液、多聚合物過氧化氫酶 組成。 DAB,即3,3-N-DiaminobenzidineTertrahydrochloride,是辣根過氧化物酶*敏感、常用的底物。在辣根過氧化物酶的催化下,DAChemicalbookB會產生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水、乙醇和二甲苯。因此,在DAB顯色后,還可使用溶于乙醇的染料進行后續(xù)的染色。過氧化物酶使底物發(fā)生反應,于反應部位產生棕色沉淀物。DAB顯色試劑盒可用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結合的辣根過氧化物酶顯色。在使用時的注意事項有:

1.顯色時間嚴格控制,非常小心,一般10 分鐘左右。以免造成過度顯色,而且顯色后數小時將會褪色;

2.請使用完后,將反應液,溶液A溶液C的蓋子旋緊,以防止溶液揮發(fā)和與空氣中的成分發(fā)生化學反應;

3.DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶*溶解再行使用;

4.顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;

5.顯色時間嚴格控制,根據情況調整,以免顯色過度。固相膜顯色數小時后即會褪色,不能長時間存在;

6.DAB 為可疑致癌物,請采取必要的防范措施。操作時應戴手套,盡量避免與皮膚接觸,用后及時*沖洗,接觸 DAB的實驗用品*好經洗液浸泡24h 后使用。

 

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