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觀察綠色熒光蛋白的儀器有哪些？
點擊次數：1703 發布時間：2023-4-6
能夠激發綠色熒光蛋白的發出熒光的主要有熒光顯微鏡、熒光體視顯微鏡、便攜式熒光蛋白激發光源、臺式熒光蛋白激發光源等產品。熒光顯微鏡需要對觀察的目標進行切樣觀察，而手持的便攜式熒光蛋白激發光源無需破壞觀察目標可以直接觀察，特別是觀察熒光蛋白在種子、愈傷、葉片等的表達，非常方便，佩戴上熒光觀察眼鏡，打開熒光蛋白激發光源的開關就可以直接觀察到熒光表達的效果。
LUYOR-3415RG激發光源效果圖
傳統的熒光顯微鏡觀測熒光蛋白有很多局限性，上海峰志儀器有限公司代理銷售的美國路陽生產的便攜式熒光蛋白激發觀測燈給轉基因研究工作者帶來了便捷性，無需取樣，打開觀測燈直接照射熒光蛋白，肉眼就能清晰看到熒光蛋白在葉片、愈傷、種子、菌落等載體上的表達。無論是綠色熒光蛋白、黃色熒光蛋白或紅色熒光蛋白，一臺觀測燈就能直接觀測2種熒光蛋白的表達。現上海峰志儀器有限公司技術工程師針對綠色熒光蛋白的觀測原理、幾種觀測方法介紹如下：
綠色熒光蛋白(GFP)：
綠色熒光蛋白GFP吸收的光譜峰值為395nm（紫外），并有一個峰值為470nm的副吸收峰（藍光）；發射光譜峰值為509nm（綠光），并帶有峰值為540nm的側峰。雖然450～490nm只是GFP的副吸收峰，但由于該激發光對細胞的傷害小，因此通常多使用該波段光源（多為488nm）。GFP熒光極其穩定，在激發光照射下，GFP抗光漂白能力比熒光素強，特別是在450～490nm藍光波長下穩定。類似的，GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠比熒光素標記的熒光抗體高，抗光漂白能力強，因此適用于定量測定與分析。由于GFP熒光的產生不需要任何外源反應底物，因此GFP作為一種廣泛應用的活體報告蛋白，其作用是任何其它酶類報告蛋白。但因為GFP不是酶，熒光信號沒有酶學放大效果，因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報告蛋白，比如螢火蟲熒光素酶等。