1.什么是熒光？
物體經(jīng)過較短波長的光照，把能量儲存起來，然后緩慢發(fā)出較長波長的光，發(fā)出的這種光就叫熒光。物質(zhì)在吸收入射光的過程中，光子能量傳遞給物質(zhì)分子。分子被激發(fā)，電子從較低能級躍遷到較高能級，形成電子激發(fā)態(tài)分子。電子的激發(fā)態(tài)的多重態(tài)用2s+1表示，s為自旋角動量量子數(shù)的代數(shù)和，數(shù)值為0或1。分子中同一軌道里所占據(jù)的兩個電子必須具有相反的自旋方向，即自旋配對。分子中全部電子都自旋配對，即s=0，該分子處于單重態(tài)，用S表示。若分子吸收能量后電子躍遷過程中不發(fā)生自旋方向的變化，這時分子處于激發(fā)的單重態(tài)；若躍遷伴隨自旋方向改變，這時分子具有兩個自旋不配對的電子，即s=1，分子處于激發(fā)的三重態(tài)，符號T表示。符號S0、S1和S2分別表示分子的基態(tài)、第一和第二電子激發(fā)單重態(tài)，T1和T2則分別表示第一和第二電子激發(fā)三重態(tài)。
激發(fā)態(tài)的分子不穩(wěn)定，可以通過輻射躍遷（熒光、磷光）和非輻射躍遷（振動弛豫、內(nèi)轉(zhuǎn)換、外轉(zhuǎn)換、系間竄越）的失活過程返回基態(tài)。熒光是分子從第一激發(fā)單重態(tài)的振動能級躍遷到基態(tài)各振動能級時所產(chǎn)生的光子輻射，熒光輻射能比激發(fā)能量低，熒光波長大于激發(fā)波長。熒光發(fā)射時間為10-9~10-7s，多為S1→S0躍遷。磷光是分子從第一激發(fā)三重態(tài)的振動能級躍遷到基態(tài)各振動能級時所產(chǎn)生的光子輻射，磷光輻射能比熒光輻射能量低，磷光波長大于熒光波長。磷光發(fā)射時間為10-4~10s，多為T1→S0躍遷。
2.什么是熒光光譜？
任何熒光化合物都具有兩個特征光譜：激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。激發(fā)光譜反映了某一固定的發(fā)射波長下所測量的熒光強(qiáng)度對激發(fā)波長的依賴關(guān)系；發(fā)射光譜反映了某一固定激發(fā)波長下所測量的熒光的波長分布。
熒光光譜能夠提供激發(fā)譜、發(fā)射譜、峰位、峰強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振度等信息，熒光分析定性和定量的基礎(chǔ)。
熒光光譜的特點：（1）Stokes位移。激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間有波長差，發(fā)射光譜波長比激發(fā)光譜波長長；（2）發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān)；（3）鏡像規(guī)則，熒光發(fā)射光譜與它的吸收光譜成鏡像對稱關(guān)系。
3.什么是熒光分析？
熒光分析就是基于物質(zhì)的光致發(fā)光現(xiàn)象而產(chǎn)生的熒光的特性及其強(qiáng)度進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量的分析方法。目前，也廣泛地作為一種表征技術(shù)來研究體系的物理、化學(xué)性質(zhì)及其變化情況，例如生物大分子構(gòu)象及性質(zhì)的研究。
熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據(jù)樣品分別選配石英池（液體樣品）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）。
熒光光譜分析可與顯微鏡耦合，獲得微區(qū)分析結(jié)果。熒光是無損傷、非接觸的分析技術(shù)，還可用于自動檢驗、批量篩分、遠(yuǎn)程原位分析和活體分析。
熒光光譜已應(yīng)用于很多不同領(lǐng)域，特別是需要無損、顯微、化學(xué)分析、成像分析的場合。無論是需要定性還是定量的數(shù)據(jù)，熒光分析都能快速、簡便地提供重要信息。
