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30-234-CR-corning康寧 G418硫酸鹽,液體
  • 30-234-CR-corning康寧 G418硫酸鹽,液體
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貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024-07-11 10:22:59

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產(chǎn)品名稱:corning康寧 G418硫酸鹽,液體
產(chǎn)品貨號:30-234-CR
產(chǎn)品規(guī)格:10 mL
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產(chǎn)品貨號:30-234-CR

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常用篩選抗生素之G418

康寧的細胞培養(yǎng)產(chǎn)品組合包括一系列抗生素和抗真菌試劑產(chǎn) 品,其中一些抗生素會改變關(guān)鍵酶的活性,還有一些則是通過 改變細胞通透性發(fā)揮作用。這些產(chǎn)品可以滿足從殺菌到抑菌的 多種需求,如預(yù)防性控制細菌、真菌、支原體或酵母菌造成的 污染,為細胞培養(yǎng)提供適合的環(huán)境;也可用于微生物/哺乳動物 細胞的篩選性培養(yǎng)。 G418(又稱Geneticin,遺傳霉素)是一種氨基糖苷類抗生素, 氨基糖苷類藥物與核糖體不可逆地結(jié)合,并通過破壞其校對能 力導(dǎo)致翻譯提前終止或錯譯,從而抑制蛋白質(zhì)合成,阻止敏感 細胞的生長。 G418對需氧和兼性需氧革蘭氏陰性桿菌、一些革蘭氏陽性菌以 及真核細胞均具有氨基糖 苷類毒性。因而常被用于 篩選表達氨基糖苷類修飾 酶的細胞株。


G418的結(jié)構(gòu)中包含雙堿基 環(huán)醇和2-脫氧鏈霉胺,它 們通過糖苷鍵與氨基糖連 接。G418的結(jié)構(gòu)獨·特性源 于 C-6 位置的羥基功能而 不是氨基功能。這種差異使其能與80S核糖體復(fù)合物特異性結(jié)合,與其他非特異性結(jié)合真 核細胞核糖體的氨基糖苷類藥物相比,G418 抑制真核細胞蛋白 合成的作用更強。 而氨基糖苷類修飾酶,即氨基糖苷類磷酸轉(zhuǎn)移酶(APH),可 共價修飾抗生素(如G418)的氨基或羥基功能,削弱藥物-核 糖體的相互作用,從而妨礙G418發(fā)揮功能,即表現(xiàn)為耐藥的效 果。  當(dāng)新霉·素抗性基因被成功轉(zhuǎn)染進真核細胞后,可獲得抗性產(chǎn)物 氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有 G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。因此G418作為一種有效的真核 翻譯抑制劑,被廣泛用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染新霉·素抗性基因(表達氨基 糖苷類修飾酶)的真核細胞的選擇和維持。推薦常用的篩選濃 度范圍為 100-800 μg/mL。 抗生素的有效殺傷濃度會因細胞類型、培養(yǎng)基、生長條件、細 胞密度、細胞的代謝速率和所處的細胞周期而異。為了克服這 些變量并確保成功,理想情況下,應(yīng)通過實驗確定每個特定的 培養(yǎng)系統(tǒng)的工作濃度,以及引入新變量時的工作濃度。工作濃 度可以通過繪制劑量反應(yīng)曲線來確定。當(dāng)在新的細胞系統(tǒng)中使 用G418硫酸鹽時,建議繪制全劑量曲線,并且在每次使用新批 次的G418硫酸鹽時,重制劑量曲線。


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