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廣州潔特生物過濾股份有限公司

細胞的體外培養檢測產品生物性能

時間:2013-8-15 閱讀:3633
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1.實驗目的:

通過細胞的體外培養來檢測產品的生物性能是否達到要求。

2.實驗原理:

體外培養的細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,將培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養,即為傳代培養。通過貼壁細胞的傳代培養,觀察細胞的生長狀態可以反映出培養產品是否達到細胞培養的要求。

3.實驗材料:

3.1 抽檢樣品:

3.2 細胞株:VERO細胞系:*貼壁細胞,主要用于接種病毒的一種細胞。

3.3 實驗試劑:RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶(876536)、小牛血清(8187648)、都購自廣州英韋創津生物試劑公司。

3.4 實驗耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。

3.5 實驗儀器:XDS-1倒置顯微鏡購自廣州粵顯光學儀器科技有限公司;

超凈工作臺購自蘇州凈化儀器設備公司;

4.實驗步驟:

4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和密度,取生長良好的細胞若干瓶,棄掉舊培養液。

4.2. 加入胰酶消化細胞,消化適度后倒去胰酶。

4.3. 加入適量培養液反復吹打數次。

4.4. 細胞計數稀釋細胞密度為1×105/ml

4.5. 將細胞接種于抽檢樣品中:

5.實驗結果:

1、Vero細胞培養24小時后10×10倍下圖片

2、Vero細胞培養48小時后10×10倍下圖片

3、細胞計數

6.結果判定

這次抽檢樣品做細胞培養檢測,細胞生長狀態正常,貼壁生長良好,10%血清培養液培養,細胞增長率符合企業標準。

 
 

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