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分光光度計(jì)的原理及分類
分光光度計(jì)的定義
分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收或發(fā)射的現(xiàn)象，通過(guò)測(cè)量不同波長(zhǎng)的光能量變化而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。
•按波段范圍分類
可分為真空紫外光譜儀，紫外-可見-近紅外分光光度計(jì)，紅外分光光度計(jì)，遠(yuǎn)紅外光譜儀等
真空紫外10-200nm 紫外200-400nm
可見400-800nm 近紅外800-2500nm
中紅外2.5um-50um 遠(yuǎn)紅外50-1000um
•按光譜測(cè)量類型分類
用于測(cè)量吸收光譜的紫外可見分光光度計(jì)；紅外分光光度計(jì)；原子吸收分光光度計(jì)
用于測(cè)量熒光光譜的熒光分光光度計(jì)；原子熒光分光光度計(jì)等
用于測(cè)量拉曼散射光譜的拉曼分光光度計(jì)；激光拉曼光譜儀等
•按光度測(cè)量方式分類
可分為單光束式分光光度計(jì)和雙光束式分光光度計(jì)等
單光束式是只用一束光線工作，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，維修方便，適用于定波長(zhǎng)處的測(cè)量和分析
雙光束式是把入射光分為兩束，一束光線通過(guò)樣品池，另一束通過(guò)參比池，然后進(jìn)行對(duì)比測(cè)量。
通過(guò)這種結(jié)構(gòu)可以快速得到測(cè)量數(shù)據(jù)以及可以消除和補(bǔ)償因光源、探測(cè)器等不穩(wěn)定因素所引起的誤差，適用于連續(xù)監(jiān)控方面的檢測(cè)。
•紫外可見分光光度計(jì)原理
紫外可見分光光度計(jì)的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱朗伯-比爾定律，是由1768年朗伯提出的光的吸收與介質(zhì)厚度之間的關(guān)系和1852年比爾提出的光的吸收與吸收介質(zhì)濃度之間的關(guān)系合并而成的。
它的數(shù)學(xué)式是A=KCL 其中A：吸光度 K：吸光系數(shù) C：濃度 L：介質(zhì)厚度
當(dāng)入射光強(qiáng)度一定時(shí)，介質(zhì)的吸光度與介質(zhì)中吸光物質(zhì)和介質(zhì)濃度的乘積成正比——定量功能的依據(jù)由于吸光物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收是其自身的物理性質(zhì)，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)摸索，我們知道了大多數(shù)物質(zhì)吸收峰的波長(zhǎng)點(diǎn)，那再根據(jù)在某一波長(zhǎng)點(diǎn)有吸收峰，可以反推導(dǎo)出吸光物質(zhì)的性質(zhì)——定性功能的依據(jù)（半定性）
•紫外可見分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)
紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)主要是由光源、單色器、樣品室、光電轉(zhuǎn)換、前置放大、電源控制、數(shù)據(jù)處理、以及外設(shè)等部分組成。