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方法及步驟

方法及實(shí)驗(yàn)步驟

 

酸價是脂肪中游離脂肪酸含量的標(biāo)志，當(dāng)酸價發(fā)生嚴(yán)重變質(zhì)，可能危害人體健康。因此，我國食用植物油標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了油脂的酸價的*。

GB5009.229-2016 《食品中酸價的測定》中規(guī)定了各類食品中酸價的三種測定方法—冷溶劑指示劑滴定法(第一法)、冷溶劑自動電位滴定法(第二法)和熱乙醇指示劑滴定法(第三法)。

各類食品中酸價的測定方法:

●常溫下能夠被冷溶劑*溶解成澄清溶液的食用油脂樣品經(jīng)有機(jī)溶解后就可以采用指示劑滴定或電位滴定進(jìn)行滴定；

●常溫下不能被冷溶劑*溶解成澄清溶液的食用油脂樣品，則經(jīng)熱乙醇溶解后，再采用指示劑滴定法進(jìn)行滴定；

●植物油料類樣品則需經(jīng)過乙醚或石油醚的索式提取，提取液經(jīng)減壓濃縮至干，再經(jīng)有機(jī)溶解后采用指示劑滴定或電位滴定進(jìn)行滴定；

●最后是含油食品類樣品則需經(jīng)過石油醚靜置提取，提取液經(jīng)減壓濃縮至干，再經(jīng)有機(jī)溶劑溶解后采用電位滴定進(jìn)行滴定。

滴定反應(yīng)的原理如下式：

 

儀器、試劑

儀器

?？艶OC9高通量油脂濃縮儀

電位滴定儀

試劑

異丙醇(C3H8O)

乙醚(C4H10O)

無水乙醚(C4H10O)

石油醚,30 ℃-60 ℃沸程

試劑配制

●氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定水溶液，濃度為0.1mol/L，按照 GB/T601標(biāo)準(zhǔn)要求配制和標(biāo)定,也可購買市售商品化試劑。

●乙醚-異丙醇混合液:乙醚+異丙醇=1+1，500ml的乙醚與500ml的異丙醇充分互溶混合, 用時現(xiàn)配。

分析步驟

試樣的制備

稱取500g粉碎的速凍牛肉樣品（其它食品，稱重量隨著所含油脂的量而變化，確保所提取油脂的量夠試樣測定），加入800ml的石油醚，并用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?0min-60min，然后在常溫下靜置浸提12h以上。再用濾紙過濾，收集并合并濾液于真空平行濃縮杯中，將其轉(zhuǎn)移至FOC高通量油脂濃縮儀上，設(shè)置好濃縮條件，濃縮溫度為35℃，振蕩速度為170rad/min，將其濃縮至干，取殘留的液體油脂作為試樣進(jìn)行酸價測定。

 

表-1.FOC9高通量油脂濃縮儀真空梯度表

試樣的測定

取一個干凈的200mL的燒杯，用天平稱取制備好的樣品10g。準(zhǔn)確加入乙醚-異丙醇混合液50ml，再加入1顆干凈的聚四氟乙烯磁力攪拌子，將此燒杯放在磁力攪拌器上，以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速攪拌30s，使油脂試樣*溶解并形成樣品溶液，維持?jǐn)嚢锠顟B(tài)。然后將已連接在自動電位滴定儀上的電極和滴定管插入樣品溶液中，注意應(yīng)將電極的玻璃泡和滴定管的防擴(kuò)散頭*浸沒在樣品溶液的液面以下，但又不可與燒杯壁、燒杯底和旋轉(zhuǎn)的攪拌子觸碰，同時打開電極上部的密封塞。啟動自動電位滴定儀，用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(2.3.1)進(jìn)行滴定。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

具體滴定體積如表2所示：

 

表-2.滴定體積

將得到的滴定體積帶入以下公式計(jì)算出酸價XAV=3.1mg/g和3.2mg/g，計(jì)算得該樣品所含酸價為3.15mg/g。

 

式中:

XAV———酸價,單位為毫克每克(mg/g);

V———試樣測定所消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫升(mL);

V0 ———相應(yīng)的空白測定所消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積,單位為毫升(mL);

c ———標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的摩爾濃度,單位為摩爾每升(mol/L);

56.1———氫氧化鉀的摩爾質(zhì)量,單位為克每摩爾(g/mol);

m ———油脂樣品的稱樣量,單位為克(g)。

注意事項(xiàng)

（1）整個實(shí)驗(yàn)盡量快速完成，防止樣品酸敗影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（2）油脂濃縮儀真空度盡量降低得慢點(diǎn)，防止溶劑暴沸。

（3）測定過程中加乙醚異丙醇的量應(yīng)超過氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液量，以保證有足夠的乙醚使油脂充分溶解，有足夠量的乙醇防止滴定過程中發(fā)生皂粒沉淀析出或皂液水解。

（4）部分樣品在溫度低的時候可能加完乙醚異丙醇后不能*溶解，可以在水浴上微熱溶解后再滴定。

（5）KOH固體會吸收空氣中的二氧化碳，導(dǎo)致滴定反應(yīng)復(fù)雜化，甚至產(chǎn)生誤差，所以配置時，稀釋用的蒸餾水在使用前應(yīng)煮沸15min，并迅速冷卻，以除去其中的二氧化碳。

儀器優(yōu)勢

針對酸價的測定，大部分樣品需進(jìn)行油脂的提取和濃縮，傳統(tǒng)旋蒸一次只能濃縮一個樣品，且需多次人為轉(zhuǎn)移提取液。而采用?？聘咄坑椭瑵饪s儀（FOC9）,一次可同時濃縮9個樣品，單個樣品濃縮體積高達(dá)900mL，濃縮效率是旋蒸的4-5倍,采用梯度真空模式，極大避免暴沸的產(chǎn)生。此外，濃縮全程無需人員值守，既減少溶劑對實(shí)驗(yàn)員的傷害，又節(jié)省人力。

高通量油脂濃縮儀