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小鼠鐵調(diào)素（Hepcidin）ELISA檢測(cè)試劑盒

Murine Hepcidin Compete^TM ELISA

背景簡(jiǎn)介：

Ganz及其團(tuán)隊(duì)在研究抗菌肽時(shí)發(fā)現(xiàn)肝臟合成的鐵調(diào)素（Park等，2001）。隨后Pigeon、Nicolas等研究者共同證實(shí)（Pigeon等，2001；Nicolas等，2001），這種肽類(lèi)激素能通過(guò)感知飲食鐵含量、系統(tǒng)鐵負(fù)荷、貧血、缺氧、紅細(xì)胞生成及炎癥等變化來(lái)調(diào)控細(xì)胞外鐵水平（Ganz，2005）。鐵調(diào)素作為急性期反應(yīng)蛋白，在炎癥性貧血中表達(dá)升高。白細(xì)胞介素-6（IL-6）是炎癥過(guò)程中調(diào)控鐵調(diào)素的關(guān)鍵因子（Nemeth等，2004）。其作用機(jī)制是通過(guò)結(jié)合已知的鐵通道—膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ferroportin）并誘導(dǎo)其降解，從而抑制細(xì)胞鐵外流。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，注射合成鐵調(diào)素可快速降低小鼠血清鐵水平（Rivera等，2005）。現(xiàn)有研究已明確鐵調(diào)素是脊椎動(dòng)物體內(nèi)鐵穩(wěn)態(tài)的核心調(diào)控因子。

目前尚未建立常用小鼠模型品系（如C57BL/6）循環(huán)系統(tǒng)中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1）蛋白的正常參考值范圍。已知小鼠hepc-1蛋白水平與其飼料鐵濃度呈顯著正相關(guān)，且與qPCR檢測(cè)的hepc-1基因表達(dá)量具有一致性（Gutschow等，2015）。

檢測(cè)原理：

本試劑盒采用基于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合ELISA原理。檢測(cè)時(shí)，將小鼠樣本、標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌放c含有hepc-1生物素結(jié)合物的緩沖液混合，隨后轉(zhuǎn)移至包被抗小鼠hepc-1抗體的ELISA微孔板中孵育。樣本中天然鐵調(diào)素（hepcidin）與hepc-1生物素結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)抗體結(jié)合位點(diǎn)，因此樣本中hepc-1含量越高，微孔中結(jié)合的生物素結(jié)合物越少。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合物后，通過(guò)鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過(guò)氧化物酶（HRP）檢測(cè)抗體結(jié)合的hepc-1生物素結(jié)合物。加入顯色底物TMB后，結(jié)合量可通過(guò)顯色反應(yīng)定量—反應(yīng)生成藍(lán)色產(chǎn)物，加入終止液后在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，顯色強(qiáng)度與樣本中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1）濃度呈負(fù)相關(guān)。完整檢測(cè)流程僅需2.75小時(shí)即可完成。

產(chǎn)品描述：

產(chǎn)品應(yīng)用：

本試劑盒專(zhuān)用于小鼠血清和尿液中鐵調(diào)素-1（hepcidin-1/hepc-1）的定量檢測(cè)。該試劑盒不識(shí)別小鼠鐵調(diào)素-2（hepcidin-2/hepc-2），hepc-2的存在不影響hepc-1的檢測(cè)準(zhǔn)確性。

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