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膠原蛋白檢測方案

背景簡介：

膠原是細胞外基質的重要組分之一，占蛋白含量的25%-30%，是組成動物皮膚、骨骼、肌腱、血管等結締組織的重要成分。檢測膠原蛋白含量可以幫助評估某些疾病的進展或治療效果，膠原水平的過高或過低都會導致疾病。例如：膠原過多會導致組織纖維化，膠原過少會導致骨關節炎。因此在許多疾病研究中測定膠原水平非常重要。

膠原蛋白常用檢測方法：

1）  羥脯氨酸比色法

膠原蛋白的氨基酸，羥脯氨酸。羥脯氨酸是一類非蛋白氨基酸，存在于哺乳動物的彈性蛋白和膠原中。這種氨基酸限于膠原的三螺旋結構中，它的存在增加了三螺旋結構的穩定性。羥脯氨酸在組織中水解被用作分析膠原含量的直接指標。羥脯氨酸含量，即：包括了所有類型的膠原及膠原前體、成熟的膠原、降解的膠原，在570nm處檢測吸光度即可，通過換算關系得到總膠原蛋白含量。

2）天狼星紅的可溶性膠原蛋白測定

天狼星紅是一種特別的染料，它與纖維性膠原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋結構特異性結合，不區分膠原蛋白種類和膠原類型，因此通過測量其吸光度來定量膠原蛋白。

3) 基于天狼星紅的組織切片染色

天狼猩紅是一種特別的染料，它與纖維性膠原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋結構特異性結合，不區分膠原蛋白種類和膠原類型，而固綠（Fast Green）與非膠原蛋白結合。由于天狼星紅和固綠分別在540 nm和605 nm處具有吸收，因此提取染料的OD值可用于計算樣本的膠原蛋白和非膠原蛋白含量。

北京博蕾德生物科技有限公司提供Quiczyme 總膠原蛋白檢測試劑盒（羥脯氨酸原理）用于定量檢測組織、細胞樣本中的總膠原蛋白含量。

檢測原理：

QuickZyme 的總膠原檢測試劑盒是基于羥脯氨酸的檢測。羥脯氨酸是一類非蛋白氨基酸，存在于哺乳動物的彈性蛋白和膠原中。這種氨基酸限于家園的三螺旋結構中，它的存在增加了三螺旋結構的穩定性。羥脯氨酸在組織中水解被用作分析膠原含量的直接指標。試劑盒檢測樣本中總的羥脯氨酸含量，即：包括了所有類型的膠原及膠原前體、成熟的膠原、降解的膠原，在570nm處檢測吸光度即可。試劑盒和操作簡單，不需做水解后的干燥步驟（需要特殊設備）。

產品優勢：

l  用于檢測所有類型的的膠原。

l  不受種屬限制

l  方便、快捷

l  線性范圍廣

l  基于羥脯氨酸的分析檢測

l  不受提取方法限制

l  不需特殊的檢測設備

產品特點：

檢測范圍：6-300ug/ml

靈敏度：2.5ug/ml

樣本量：50-500ul

檢測樣本：細胞提取物、組織提取物、不受種屬限制、不受膠原類型限制。

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