兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素

貨號：B2880

規(guī)格：1ml*5支

成分：兔抗綿羊紅細(xì)胞溶血素

效價：1:4000

保存：4-8℃（避光保存）

用途：科研、教學(xué)實驗使用，如總補(bǔ)體溶血活性（CH50）檢測、補(bǔ)體結(jié)合實驗（cft）等

產(chǎn)品規(guī)格：1ml/支

注意事項：請穿戴實驗服及一次性手套操作

血清總補(bǔ)體溶血活性（CH50）測定方法

一、原理

利用綿羊細(xì)胞與相應(yīng)抗體（溶血素）結(jié)合成的復(fù)合物，可激活血清中的補(bǔ)體，導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解，當(dāng)紅細(xì)胞和溶血素量一定時，在規(guī)定反應(yīng)的時間內(nèi)，溶血程度與補(bǔ)體量及活性呈正相關(guān)。在接近50%溶血（CH50）時，二者之間近似直線關(guān)系，故以50%溶血作為最敏感的判斷終點。以引起50%溶血所需的最小補(bǔ)體量為一個CH50U，可計算出待測血清中總的補(bǔ)體溶血活性，以CH50U/ml表示。

 本實驗主要反映補(bǔ)體經(jīng)典活化途徑的溶血功能，其結(jié)果與補(bǔ)體C1～C9各組成分的量及活性均有關(guān)。

二、試劑及配制

1.緩沖-生理鹽水：

（1）貯存液：

     Na2HPO4.12H2O        2.85g

     KH2PO4               0.27g  

     NaCl                17.00g

     蒸餾水定容至100ml，4℃保存?zhèn)溆?/span>

（2）應(yīng)用液：5ml貯存液加95ml蒸餾水，再加10%硫-酸鎂0.1ml，當(dāng)日配制，12小時內(nèi)使用。

2.2%綿羊紅細(xì)胞：無菌采取綿羊血液，于等量Alsever液中可保存3周。用前以緩沖液洗3次，并配成2%細(xì)胞懸液。必要時可用吸光光度法或細(xì)胞計數(shù)法使懸液細(xì)胞濃度標(biāo)                準(zhǔn)化。

3.溶血素：將綿羊紅細(xì)胞溶血素（效價1:4000），用應(yīng)用液做1:2000倍稀釋（即1ml溶血素加1999ml應(yīng)用液）。

4.待測血清：新鮮血液室溫放置30min，再4℃放置60min，使血-塊收縮，4℃離心（3000r/min）10min，取上清，-20℃保存。

三、操作步驟

試管法（改良Mayer法）

1.致敏羊紅細(xì)胞：2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素（1:2000），混勻，置37℃水浴30min。

2.稀釋血清：待測血清0.2ml，加應(yīng)用液3.8ml，稀釋度為1:20。

3.配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管：全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞2ml加8ml蒸餾水，混勻。50%溶血管:取全溶血管液2ml加緩沖液2ml。

4.按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置37℃水浴30min

兔抗綿羊紅細(xì)胞抗體 溶血素