信帆生物告訴您：ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理方法

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elisa實(shí)驗(yàn)的樣本處理方法如下：

液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

 1. 血清：

室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保 存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心

2. 血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心 20 分 鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

3. 尿液：

用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀 形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

信帆生物告訴您：ELISA實(shí)驗(yàn)樣本處理方法

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬/ml 左 右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘 左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融 化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻 漿器將標(biāo)本勻漿化。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢 測，其余冷凍備用。

組織勻漿，按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液可以選取生理鹽水，也可以選取PBS,但一般是選PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.

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