1. TEMED和10%過硫酸銨zui后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨溶液在4℃有效期為一周； TEMED易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內(nèi)可以凝固，如溫度過低，可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加1mL ddH2O封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸水紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。

2. 配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調(diào)整，主要是調(diào)整30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%），zui后用水補(bǔ)足總體積。

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配膠說明：

1. 先在過硫酸銨干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克過硫酸銨需加水10mL)配置成10%溶液，將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃，制備凝膠時(shí)融化后使用。4℃保存有效期7-30天。

2. 檢測SDS溶液是否澄清，若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放37℃片刻至溶解，不影響效果。

3. 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。

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