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供應(yīng)簡介

REPOTMHIF-1慢病毒報告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測HIF-1轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報告基因慢病毒顆粒。HIF-1（hypoxia-inducible factor-1）是氧平衡有關(guān)的關(guān)鍵蛋白并且在癌癥的發(fā)展，以及在心血管疾病中有著顯著作用。

詳細介紹

REPO^TMHIF-1慢病毒報告基因主要用于檢測細胞中HIF調(diào)控的信號通路活性、藥物研究以及基因過表達和RNAi的表型分析等。

pGMLVHIF-1-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點插入了多個HIF-1結(jié)合位點，可以高靈敏度地檢測HIF-1的激活水平。采用慢病毒作為報告基因的優(yōu)點在于它能夠感染多種難感染的細胞，比如原代細胞，干細胞，神經(jīng)元細胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰毎蚪M內(nèi)，實現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
HIF-1response element	2191-2222
Luciferase	2288-3940
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3970-4478
Puro^r（puromycin resistance gene）	4499-5098
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5112-5703
3'LTR	5906-6542
PUC origin of replication	7685-7012
Amp^r	8826-7830

包裝清單：

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022020	REPO^TMHIF-1慢病毒報告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說明書	-

使用說明：

HIF-1報告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進行檢測。

注意事項：

1. 病毒操作時使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺操作病毒，請不要打開風(fēng)機。

2. 病毒操作時請穿實驗服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時超凈臺有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細胞感染情況時應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗臺前，用70%乙醇清理實驗臺。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時間過長，使用前請重新檢測病毒滴度）

參考文獻：

[1]Martinez-Outschoorn UE, Trimmer C, Lin Z, Whitaker-Menezes D, Chiavarina B, Zhou J, Wang C, Pavlides S, Martinez-Cantarin MP, Capozza F, Witkiewicz AK, Flomenberg N, Howell A, Pesl RG, Caro J, Lisanti MP, Sotgia F.

Autophagy in cancer associated fibroblasts promotes tumor cell survival: Role of hypoxia, HIF1 induction and NFκB activation in the tumor stromal microenvironment.

Cell Cycle. 2010 Sep 1;9（17）:3515-33. Epub 2010 Sep 9.

[2] Smirnova NA, Rakhman I, Moroz N, Basso M, Payappilly J, Kazakov S, Hernandez-Guzman F, Gaisina IN, Kozikowski AP, Ratan RR, Gazaryan IG.

Utilization of an in vivo reporter for high throughput identification of branched small molecule regulators of hypoxic adaptation.

Chem Biol. 2010 Apr 23;17（4）:380-91. doi: 10.1016/j.chembiol.2010.03.008.

產(chǎn)品價格：

貨號	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報價/元
GM-022020	Lentivirus HIF-1 luciferase reporter 慢病毒報告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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