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產(chǎn)品信息

Ceturegel™ Matrix GFR，LDEV-Free 基質膠是從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF等相關因子。Ceturegel™ GFR基質膠是經(jīng)特殊處理后得到的低生長因子基質膠，能有效保證一些需要低生長因子條件下的實驗操作所需，如與信號通路和生長因子相關的實驗。在室溫條件下，聚合形成具有生物學活性的三維基質，模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化，可用于對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達等的研究。

基質膠形成的三維培養(yǎng)基質，可促進上皮細胞、肝細胞、塞爾托利氏細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。CeturegelTM基質膠能影響成鼠肝臟細胞和人乳腺上皮細胞三維培養(yǎng)物的基因表達。同時，CeturegelTM 基質膠可用作多種腫瘤細胞侵襲研究的基本支架，體內外血管新生研究的基質，以及體內動物模型移植瘤細胞生長的三維支架。CeturegelTM基質膠還能支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。

YEASEN 基質膠為無菌制品，濃度為8~20 mg/mL，滿足多種實驗要求。

產(chǎn)品組分

運輸與保存方法

干冰運輸。-20℃保存，有效期兩年。

產(chǎn)品應用

1. Ceturegel^TM基底膜/基質膠的融化與保存

【注】：Ceturegel^TM基質膠對溫度非常敏感，千萬不可多次重復凍融。Ceturegel^TM基質膠的分裝以及凝膠前的準備過程中都必須在冰上（4℃）操作，因為溫度稍微提高，都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象，從而導致基質膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進行預冷。

a）收到產(chǎn)品后，如果暫時不使用，請整瓶直接放到-20℃凍存（不要放在無霜冰箱內）。

b）第一次使用，將整瓶Ceturegel^TM基質膠放入冰盒內再放到4℃過夜，使其充分融解。建議：在4℃ 14000 rpm離心20 min，小心吸取上清。

2. Ceturegel^TM基底膜/基質膠的使用特別注意

基質膠在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Ceturegel^TM基質膠的成膠性能與穩(wěn)定性，最終稀釋濃度不應低于3 mg/mL（Ceturegel^TM基質膠原液的濃度因批次不同有差異）。可用無血清培養(yǎng)基來稀釋Ceturegel^TM基質膠，稀釋后需要立即使用。

A. 薄膠制備方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Ceturegel^TM 基質膠。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，按50 μL/cm2生長面積的濃度加入Ceturegel^TM基質膠。

3）在37℃放置30min，此時平板即可使用。

B. 厚膠制備方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質膠。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，將培養(yǎng)的細胞與Ceturegel^TM基質膠混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長面積的濃度加入CeturegelTM基質膠。

3）在37℃放置30min，此時即可加入細胞培養(yǎng)液。細胞也可生長在此厚膠的上層。

C．薄層包被方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質膠。

2）采用無血清培養(yǎng)基稀釋Ceturegel^TM基質膠到需要的濃度。建議根據(jù)具體的實驗做個梯度實驗，從而確定最佳的包被濃度。

3）將稀釋的Ceturegel^TM基質膠加入需要包被的培養(yǎng)器皿中，包被量至少覆蓋細胞的所有生長表面。室溫下孵育1小時。

4）去除未凝固結合的Ceturegel^TM基質膠，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。此時平板即可使用。

【注】：Ceturegel^TM基底膜/基質膠包被的平板最好當天使用，但也可根據(jù)具體應用調整。包被好的平板加入培養(yǎng)基后，在37℃最久可存放1周。

產(chǎn)品特性

Ceturegel^TM基質膠會有色差變化（淡黃色到深紅色），是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5% CO2平衡后色差即會減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使Ceturegel^TM基質膠分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進行，試劑瓶瓶蓋可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證Ceturegel^TM基質膠呈勻漿狀。

細胞可在0.5 mm厚度的Ceturegel^TM基質層表面生長，也可在1 mm厚度的Ceturegel^TM基質膠三維基質內生長。過度稀釋的Ceturegel^TM基質膠會形成非膠質的蛋白層，可以用于細胞貼壁，但不能用于細胞的分化研究。

【注】：可將融化后的Ceturegel^TM分裝在多個小管，所有分裝均需用預冷的凍存管，迅速冷凍并保存，避免多次凍融。

Ceturegel^TM在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠，因此融化時在4℃冰上過夜解凍（4℃時會隨著溫度的上升部分成膠）。所有用品在使用前需置于冰浴，必須使用預冷的移液管、吸頭及小管操作Ceturegel^TM基質膠。成膠后的Ceturegel^TM基質膠可以在4℃ 24－48小時后重新呈液態(tài)。

注意事項

1. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行，與產(chǎn)品接觸的實驗器材（如：槍頭、產(chǎn)品管等）使用前需預冷。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅供科研使用，禁止用于人體。

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HB220331