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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40210ES10 | 應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥 |
產品介紹
ATP Luminescent 細胞活力檢測試劑盒|ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit
產品描述
ATP是細胞內最重要的能量分子，可以用來衡量細胞新陳代謝水平，并與活細胞數目具有良好的線性關系，因此，可通過ATP含量反應活細胞的數目。本試劑盒借ATP依賴的熒光素酶催化的熒光素發光反應，通過化學發光信號測定細胞內 ATP含量，從而檢測細胞活力或定量檢測活細胞數目，靈敏度高、線性范圍寬。本試劑盒兼容少量樣品檢測以及大量樣品的高通量篩選檢測。
ATP Luminescent 細胞活力檢測試劑盒本試劑盒提供的發光法細胞活力檢測試劑線性范圍寬、靈敏度高、穩定性好。96孔板中，在100個至100,000個細胞范圍內有良好的線性關系，但不同細胞的檢測數量上限會有不同。此外，操作簡單，試劑盒中提供的檢測試劑為即用型，讀數穩定，檢測速度快，完成檢測僅需約10 min，無需洗滌細胞，也無需更換或去除培養液。相比于其他常見的細胞活力測定方法，如Calcein-AM、CCK-8等，發光法細胞活力檢測更加簡單快捷。
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20 oC避光保存，有效期3年。
注意事項
1）試劑中含有熒光素酶，反復凍融會影響其活性。建議分裝后置于-20 ℃避光保存。
2）試劑及細胞樣品使用前均需平衡至室溫，以避免酶催化效果的影響。
3）藥物含量較高時可能會干擾熒光素酶反應，從而影響化學發光信號。建議設置含有藥物的細胞培養液照孔以排除溶劑的干擾。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5）本產品僅供科研使用。
使用方法
一、細胞培養
使用適合進行化學發光檢測的96孔板，每孔接種100 μL細胞（根據培養時間確定初始接種的細胞密度，檢測時每孔細胞數量不宜超過10萬個），同時設置不含細胞的培養液的孔作為陰性對照。37 ℃，5 % CO2培養細胞。也可以設置細胞的濃度梯度，以得到最佳的實驗結果。根據需要在合適的時間加藥處理細胞。
二、（可選）ATP標準曲線的制作
把自備的ATP標準溶液用 PBS稀釋成適當的濃度梯度，96孔板每孔加入100 μL的標準品。
三、細胞活力檢測
1. 融解凍存的發光法檢測試劑，并平衡至室溫；
2. 取出細胞培養板，室溫平衡10 min；
3. 96孔板每孔加入100 μL檢測試劑（由于孔的邊緣效應，可能會導致發光信號不穩定，不建議在邊緣鋪板）；
4. 室溫振蕩2 min，以促進細胞的裂解；
5. 室溫放置10 min，使發光信號趨于穩定；
6. 使用多功能酶標儀進行化學發光檢測，檢測波長560 nm。根據儀器要求設置相應的參數，每孔的檢測時間一般為0.25-1 s，具體需根據儀器的檢測靈敏度進行適當的調整；
7. 根據化學發光讀數計算細胞的相對活力，或根據ATP標準曲線計算ATP含量從而得出細胞的相對活力。
【注】：檢測效果因細胞的種類不同而異，對于一些ATP含量特別高的細胞，在細胞數量達到100,000以上可能會出現化學發光讀數繼續升高，但喪失線性關系。
HB220913
