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產品簡介
產品介紹
LysoSensor™ Green DND-189
溶酶體綠色熒光探針
產品信息
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
40767ES50 | LysoSensor™ Green DND-189 溶酶體綠色熒光探針 | 50 μl | -20℃避光 | 359.00 |
產品描述
LysoSensor®系列探針是主要對活細胞中的酸性區室（如溶酶體、頂體精子）動態合成和功能進行研究的一類熒光探針，該類探針的染色具有向酸性，可通過質子化作用在酸性細胞器內累積。該類探針的這種質子化作用還可解除染料的熒光淬滅性，使其所發射的熒光強度更強。因此，與LysoTracker系列探針相比，LysoSensor®系列探針隨著細胞器的酸化程度其熒光強度呈pH依賴型(向酸)增強。
本品LysoSensor™ Green DND-189具有較低的pKa值，僅在酸性區室內才具有熒光。本品以溶于無水DMSO的1 mM儲存液形式提供。
如對活細胞中的酸性區室進行選擇性標記和染色，可選擇LysoTracker®系列探針。
產品性質
分子式（Molecular Formula） | C24H22N4O2 |
分子量（Molecular Weight） | 398.46 |
Ex/Em | 443⁄505 |
pKa | ～5.2 |
顏色（Color） | 綠色 |
結構式（Structure） |
|
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃避光干燥保存，避免反復凍融，有效期6個月。
注意事項
1）不能儲存在無霜冰箱，建議按照單次用量分裝于-20℃凍存。
2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。*工作濃度需根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優化。
1. 工作液的配制
利用培養基或合適的緩沖液將1 mM 儲存液稀釋至工作濃度，推薦工作液濃度至少為1 µM；
【注1】：為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2）若細胞在染色后于不含染料的培養基中孵育，會觀察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現象。
【注2】：工作液現配現用。
2. 染色
2.1 對于貼壁細胞
1）將細胞置于培養皿中的蓋玻片上，加入合適培養基，使其爬片生長。
2）待細胞生長到合適豐度，吸除培養液，加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長狀態下孵育30 min～2 h（具體孵育時間需根據細胞類型而定）。
3）利用新鮮培養基替換上述染色液并在熒光顯微鏡（含合適濾片）下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。
2.2 對于懸浮細胞
1）離心，吸除上清。
2）利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞，于生長狀態下孵育30 min～2 h（具體時間需根據細胞類型而定）。
3）離心，吸除染色液，加入新鮮培養液重懸細胞。
4）置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或加長染色時間。
【注】：對于懸浮細胞，也可將細胞貼附于經BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上，然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。
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